马立克病毒致瘤过程中宿主细胞长链非编码RNA作用的研究

Marek’s disease virus (MDV) is one of crucial pathogens to harm poultry industry and MDV-serotype 1 infects chicken and causes malignant T-cell lymphomas and immune suppression. MD outbreaks is still caused by very virulent (vv) and very virulent plus (vv+)in flocksdespite vaccination，with high economical losses in the poultry industry. Therefore, knowledge of MDV pathogenesis plays a very significant role of prevention and control in MD specifically,as well as herpesvirus diseases. It is well known that lncRNAs play a role in tumorigenesis，immunoregulation and so on. In this study, data mining will be run for potential lncRNAs and its target genes during MDV infection by sequencing of lncRNAs and constructing of lncRNA-mRNA coexpression network based on our previous study results . Potential lncRNAs related with p53 signal pathway will be screened.Moreover, the functions of potential lncRNAs will be tested using techniques of overexpression/knockdown using MD cell lines, chick embryo fibroblast and MD animal model. The results will provide insights into molecular mechanisms of MD tumorigenesis and new targets for lncRNAs application as biomarkers on diagnosis and therapy of herpesvirus diseases.

马立克病毒（MDV）是对养禽业危害最为严重的病原之一，其MDV-1型可引起鸡T淋巴细胞瘤和严重免疫抑制。鸡马立克氏病（MD）是病毒性肿瘤研究理想的动物模型。因此对该病毒致病机理的研究，不论对因MD爆发造成养禽业巨大经济损失的防控，还是对其它疱疹病毒科病毒引起的疾病防治都具有重大意义。研究发现长链非编码RNA（lncRNAs）与肿瘤发生密切相关。.本项目是基于前期研究发现的与p53基因相关的lncRNAs差异表达的基础上，应用转录组测序和共表达网络构建，挖掘MDV致瘤过程中宿主细胞差异表达lncRNAs及其作用；应用MD淋巴瘤细胞系、鸡胚成纤维细胞等，通过过表达/敲减进行lncRNAs功能获得性和缺失性验证，确定筛选的lncRNAs与p53通路互作关系，为MD肿瘤形成分子机制的研究奠定基础，为lncRNAs作为生物标志物，在疱疹病毒病诊断及治疗方面的应用提供参考。

鸡马立克氏病（MD）是危害养禽业健康发展的重大疫病之一，其是病毒性肿瘤研究的理想经典动物模型，由马立克病毒（MDV）引起。相关研究表明长链非编码RNA（lncRNA）与肿瘤发生密切相关，因此，深入挖掘MDV致瘤过程中宿主lncRNA及其功能，对该病毒致病机理研究和MD诊断及科学防治具有重要意义。.本项目按计划完成了去核糖体转录组测序，预测分析了差异表达lncRNA及mRNA，构建了MDV致瘤过程中宿主lncRNA-mRNA共表达关系网络，初步揭示了lncRNA 53BP1与p53通路靶基因及端粒酶活性的互作关系，基本阐明了MDV感染后宿主细胞lncRNA表达情况及其作用。发表学术论文5篇，其中SCI收录3篇，培养硕士研究生5名，在读博士研究生1名。.经全体人员团结协作，按预期研究计划取得成果如下：建立了MD动物模型，完成了MDV感染后鸡样本lncRNA去核糖体转录组测序分析，获得了MDV感染不同阶段鸡脾脏组织差异表达基因和lncRNA，构建了lncRNA-mRNA共表达网络；验证分析了MDV感染鸡不同阶段p53通路相关的差异表达的6个新lncRNA和10个基因，筛选出了靶向肿瘤抑制因子p53结合蛋白1（Tumor suppressor p53-binding protein 1，TP53BP1）的新lncRNA 53BP1，完成了其功能获得性和功能缺失性验证，检测了MDV感染鸡靶向TP53BP1的lncRNA及TP53BP1、p53、MDM2、MDM4、TERT等基因表达水平和端粒酶活性动态趋势分析，基本阐明了lncRNA 53BP1对p53通路调控作用和端粒酶激活作用，初步揭示了其与TP53BP1和端粒酶催化亚基的互作关系，为MD肿瘤形成分子机制的研究奠定了理论基础，为lncRNA作为生物标志物在MD及其它疱疹病毒病诊断和防治方面的应用提供了重要参考。