青花菜原生质体植株再生及其遗传转化体系的建立

以上海1号青花菜为供试品种，在室温（15-25℃）和自然光照下生长的无菌苗下胚轴为试材，采用琼脂糖小块培养，细胞分裂频率为35%，植板率达5%，绿芽分化率为20%。得到一批再生植株，移栽成活并能开花结籽。通过研究建立了一整套青花菜原生质体再生植株体系。在遗传转化研究中，采用与根癌农杆菌EA105共培养再经抗生素筛选方法。带柄子叶遗传转化得到了一批具抗性的再生植株，转化率达22%，在原生质体遗传转化中，改进了无菌苗获得，培养基组成并加大使用的原生质体密度，分裂频率提高到80%，植板率达10%；与农杆菌共培养后植板率为1%，经抗生素筛选后分化出绿芽。经X-Gluc溶液染色检测并与对照比较，表明GUS基因已导入到再生植株和带绿芽的愈伤组织中。