长寿命浆细胞在嗜酸粒细胞性CRSwNP发病机制中的作用

Chronic rhinosinusitis (CRS) is a heterogeneous disorder. The initial trigger and pathogenesis of this disorder remain enigmatic. Our recent study has shown that local immunoglobulin E (IgE) is persistently increased in nasal polyps (NP) of patients with eosinophilic CRS with NP (CRSwNP), which may lead to the activation of mast cells and subsequent eosinophilic inflammation. However, the detailed mechanism of persistently high level of local IgE in NP is unknown. Recent studies suggest long-lived plasma cells in bone marrow cloud secrete antibodies sustainably and play an important role in systemic humoral immunity. Whether Ab-secreting cells resident at nasal mucosa can be long-lived as well as provide long-term humoral immunity is a matter of little research. In this project, we will try to elucidate the role of long-lived plasma cells in the pathogenesis of CRSwNP through human CRS sample study, in vitro cell culture and ex vivo tissue culture experiment, and animal experiment . Flow cytometry, immunopathology, and molecular biology techniques will be used to study phenotypic expression and function. We believe this project will provide novel insights into the pathogenesis of CRS, particularly eosinophilic CRSwNP. Also, this project will provide a new way for the the precise treatment of CRSwNP.

慢性鼻-鼻窦炎（CRS）是一类异质性疾病，其发病的始动因素不明。我们前期研究显示伴鼻息肉 (NP) 的CRS (CRSwNP) 患者的NP局部免疫球蛋白E (IgE)表达持续升高，致使肥大细胞活化，进而导致嗜酸粒细胞性炎症。但NP局部IgE持续高水平的精确机制并不明确，新近研究提示骨髓中的长寿命浆细胞可持续分泌抗体，对维持全身的体液免疫反应起到了重要的作用，然而有关鼻黏膜局部浆细胞能否提供持续的免疫反应而长期存在的研究尚属空白。本课题拟通过对人体标本的分析、体外细胞及组织培养、小鼠模型的建立，采用流式细胞分析、组织病理学、分子生物学等技术手段探讨长寿命浆细胞在CRSwNP发病机制中的作用；力图阐明CRS，特别是嗜酸粒细胞性CRSwNP的发病机制，并为CRSwNP的精准治疗提供新途径。

背景：浆细胞和免疫球蛋白对于慢性鼻-鼻窦炎及鼻息肉的诱导和维持发挥了重要作用。 在次级免疫反应过程中，浆细胞存活和免疫球蛋白的产生受局部环境的调节。 本项目致力于研究人鼻息肉中长寿命浆细胞（long-lived plasma cells , LLPCs）的存在，LLPCs的鼻息肉特异性生存微环境及探讨LLPCs的意义。综合应用气-液界面系统对鼻黏膜组织块进行体外培养；采用ELISA检测培养上清液中的免疫球蛋白水平；通过免疫组织化学和免疫荧光判定鼻息肉中LLPCs的特征；定量qRT-PCR，免疫组织化学，免疫荧光和蛋白质印迹检测鼻黏膜组织内神经营养因子及其受体的表达。研究结果标明：嗜酸性和非嗜酸性鼻息肉中CD138 +总浆细胞的数量和BCL2 + CD138 + 浆细胞的数量较正常鼻黏膜中这些细胞的数量均增加。鼻息肉组织块体外培养上清液中可检测到IgG，IgA和IgE的产生，并且这一现象可持续大于4周。 尽管培养后鼻息肉组织块中浆细胞的总数较培养前浆细胞总数减少，但是BCL2 + CD138 +浆细胞的数目保持稳定。 神经生长因子 (nerve growth factor，NGF) 及其高亲和力受体 (tropomyosin receptor kinase A, TrkA) 的表达在嗜酸性和非嗜酸性鼻息肉中均上调。 此外，BCL2 + CD138 +浆细胞的数量与鼻黏膜组织中NGF和TrkA mRNA表达呈正相关。 更重要的是息肉组织中浆细胞表达TrkA。 研究结论：人鼻息肉组织中存在LLPCs，NGF及其受体构成的鼻黏膜微环境可能对LLPCs的存在及维持发挥了重要的作用。 LLPCs可能是抑制鼻息肉中局部免疫球蛋白产生的新型治疗靶标。