探索干扰素诱导基因IFIT1对狼疮肾炎足细胞损伤机制

Lupus nephritis (LN) is the main factor affecting the long-term prognosis of systemic lupus nephritis (SLE) patients. The podocyte structural or functional abnormalities play an important role in the pathogenesis of LN. However, the specific mechanism of podocyte damage in LN is still unknown.Interferon (IFN) pathway is an important pathogenic pathway in SLE.Podocytes can produce a lot of IFIT1 protein under stimulation of type Ⅰ interferon or dsRNA or virus. Our previous research showed that interferon-induced gene IFIT1 may be involved in kidney damage of LN. In order to determine whether IFIT1 participate in podocytes injury in LN, and whether it can reverse or partially reverse the abnormal structure and function of podocytes by down-regulating IFIT1 expression, podocytes injury and its IFIT1 expression in different week-old NZB / NZW F1 lupus prone mice will be examined, the function of IFIT1 on podocytes, and involved key signaling pathway will be investigated. This not only may provide new proof for type I interferon pathway in LN pathogenic mechanism，but also find a new target for treatment of LN, further improve the therapeutic efficacy and prognosis which is of great importance.

狼疮肾炎（LN）是影响系统性红斑狼疮（SLE）患者远期预后的主要因素。足细胞结构或功能异常在狼疮肾炎发病中起重要作用。然而狼疮肾炎中足细胞受损的具体机制不明。干扰素（IFN）通路是SLE重要的致病通路。足细胞在Ⅰ型干扰素或dsRNA或病毒刺激下，可诱生丰富的IFIT1。我们前期的研究工作发现干扰素诱导基因IFIT1可能在疾病的早期参与了肾脏的损伤。因此为明确IFIT1是否参与了狼疮肾炎中足细胞的损伤，下调足细胞IFIT1的表达，是否能逆转或部分逆转足细胞的结构和功能的异常，本研究检测了不同周龄NZB/NZW F1自发狼疮鼠肾足细胞损伤及足细胞IFIT1表达状况；同时以肾脏足细胞为研究对象，观察IFIT1对足细胞结构及功能的影响，以及涉及的关键信号通路。此不仅为完善I型干扰素通路在LN中致病机制提供新的依据；而且对寻找治疗LN的新靶点、进一步改善LN的治疗疗效及预后具重要意义。

肾损害是SLE患者死亡的主要原因，前期研究SLE病例IFIT1表达升高。因此，我们进行了IFIT1表达对动物肾脏病变作用研究。方法：18只雌性MRL/lpr小鼠作为研究组，18只BALB/c小鼠作为对照组。同时进行尿蛋白定量分析，补体C3和C4，和抗ds-DNA抗体测定。HE染色、PAS染色和透射电镜观察肾组织病理变化。免疫荧光显微镜观察足细胞蛋白与IFIT1表达之间的关联。采用t检验或单因素方差分析比较连续变量。足细胞蛋白和IFIT1表达之间的相关系数采用线性回归分析估计。结果：MRL/ lpr小鼠相比同月龄对照组，尿蛋白、抗dsDNA抗体显著升高，补体C3、C4降低。染色和透射电镜分析观察MRL/lpr小鼠肾小球数之间的病理变化，包括细胞肥大，基底膜增厚，细胞管型增加。线性回归分析发现IFIT1的光密度值与F-肌动蛋白，nephrin、podocin呈负相关，但不包括synatopodin。结论：IFIT1过表达与足细胞损伤有关。. 另外通过过表达IFIT1慢病毒包装、生产、感染小鼠足细胞，研究了过表达IFIT1对小鼠足细胞影响。CCK-8检测发现过表达IFIT1可显著抑制小鼠足细胞增殖。流式细胞仪分析显示，过表达IFIT1显著诱导足细胞凋亡。更为重要的是，IFIT1过表达能够降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，并且增加凋亡标记蛋白caspase 3、促凋亡蛋白Bax和磷酸化p38表达。总之，我们的结果首次表明小鼠足细胞过表达IFIT1能够抑制足细胞增殖和诱导足细胞凋亡。. 本研究表明，IFIT1可能减少足细胞数量，是狼疮肾病的良好候选靶标。