干扰素调节因子8在狼疮肾炎发病中的机制研究

Studies have confirmed that the interferon singal pathway play important role in lupus nephritis(LN). Interferon regulatory factor 8 (IRF8) knockout can inhibit LN disease progression in the animal model. However, the mechanism is unclear. In our previous study, we found that IRF8 was high expressed in the normal human kidney tissue. Further more, IFN-γ could induce IRF8 expression in HEK293 cells, together with increased cleaved-PARP. We further found that IRF8 inhibited the expression of YAP1 and survivin, as well as upregulated expression of tumor suppressor genes CASP1, p21 and PTEN .Therefore, we assume that in LN patients, high levels of plasma interferon may up regulate IRF8 expression in kidney cells, which could activate apoptosis signaling pathway and induce kidney cellular damage. Based on the above research and assumption, we aimed to study the effect of IRF8 on kidney cells in HEK293 cell line and LN mouse model (NZB/W F1), explore the machanism of IRF8 in lupus nephritis by CHIP-seq experiment. Our study would be helpful in providing a new therapeutic target for the treatment of LN.

研究证实干扰素信号通路参与狼疮肾炎（LN）发生发展，在动物模型中干扰素调节因子8（IRF8）基因敲除能够抑制LN疾病进展，但具体作用机制尚不明确。申请者前期研究发现，IRF8在人肾脏组织高表达，IFN-λ能够通过上调IRF8的表达促进cleaved-PARP及CASP1、p21、PTEN等凋亡相关基因的表达并抑制增殖相关基因Survivin、YAP1的表达，发挥其促细胞凋亡及抗增殖等作用。由此，我们提出假说：在狼疮肾炎中，血浆中高水平的干扰素能上调肾脏细胞中IRF8的表达，进而促进IRF8下游靶基因的表达，激活凋亡等相关信号通路，导致肾脏细胞损伤。本研究拟在HEK293细胞及LN小鼠模型（NZB/W F1）中探索IRF8对肾脏细胞的影响，利用CHIP-seq实验探索IRF8下游靶基因参与LN发病的分子机制。本研究将进一步阐明IRF8参与LN的发病机制，为探寻LN新的治疗靶点提供新思路。

研究背景：系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种全身性的免疫炎症性疾病，肾脏是其最常累及的器官之一，肾脏损害的严重程度直接影响SLE患者的预后，是SLE 患者的主要死亡原因之一。研究证实干扰素信号通路参与狼疮肾炎（LN）发生发展，在动物模型中干扰素调节因子8（IRF8）基因敲除能够抑制LN疾病进展，但具体作用机制尚不明确。..研究内容：申请者前期研究发现，IRF8在人肾脏组织高表达，IFN-γ能够通过上调IRF8的表达促进cleaved-PARP及CASP1、p21、PTEN等凋亡相关基因的表达并抑制增殖相关基因Survivin、YAP1的表达，发挥其促细胞凋亡及抗增殖等作用。由此，我们提出假说：在狼疮肾炎中，血浆中高水平的干扰素能上调肾脏细胞中IRF8的表达，进而促进IRF8下游靶基因的表达，激活凋亡等相关信号通路，导致肾脏细胞损伤。本研究在HEK293、HK2细胞及LN小鼠模型中探索IRF8对肾脏细胞的影响，并进一步探索IRF8下游靶基因参与LN发病的分子机制。..研究结果：RT-PCR及免疫组化证实IRF8在人肾小管上皮细胞中表达。IFN-γ能诱导IRF8的表达促进肾脏细胞凋亡。IRF8作为核转录因子，入核后通过N端的DNA结合保守区域与基因的干扰素刺激反应原件（IFN-stimulated response element，ISRE）结合，调控干扰素相关基因表达，本研究利用RT-PCR证实IRF8能上调凋亡相关基因Casp1等的表达，IFN-γ通过诱导IRF8进一步促进Casp1等的表达。Western blot证实IFN-γ能诱导IRF8促进凋亡相关基因，如P21、BCL2、NF-κB P65等的表达，提示IRF8有促凋亡作用。..科学意义：本研究将进一步阐明了IRF8参与LN的发病机制，为探寻LN新的治疗靶点提供新的思路。.