腺苷酸环化酶相关蛋白2新剪切体CAP2-ES促进乳腺癌侵袭转移机制研究

Breast cancer is one of the most common tumors in our country and in the world. The recurrence and metastasis is the important cause of curative effect. So the study of the mechanism of breast cancer metastasis will provide a theoretical basis for clinical diagnosis and treatment of breast cancer. We have found and identified a new splicing transcript of the adenylyl cyclase associated protein 2(named CAP2-ES).The expression level of CAP2-ES was higher in breast cancer. Overexpression of CAP2-ES could induce EMT (Epithelial-Mesenchymal Transition) in breast cancer cells. CAP2-ES may play an important role in breast cancer invasion and metastasis. We will detect the expression of CAP2-ES in breast cancer tissues by qPCR, then analysis of its relationship with the clinical pathological characteristics and the prognosis of these patients. Furthermore, we will investigate the invasion and metastasis character of the CAP2-ES gene in breast cancer both in vitro and in vivo. The function and the metastasis mechanism of CAP2-ES in breast cancer will also be explored.

乳腺癌是我国乃至世界范围内女性最常见的肿瘤之一，其复发和转移是影响疗效和预后的重要原因，开展乳腺癌转移机制的基础研究，揭示其转移机制，将为乳腺癌的临床诊断和治疗提供理论依据，具有重要意义。我们前期发现并鉴定了腺苷酸环化酶相关蛋白2新剪切体CAP2-ES，发现其在乳腺癌细胞及组织中表达升高；过表达CAP2-ES则能诱导乳腺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)，并增强细胞的侵袭能力。提示CAP2-ES可能在乳腺癌侵袭转移中发挥重要作用。本课题拟通过qPCR 等方法明确CAP2-ES在乳腺癌中的表达，并分析其与患者临床病理特征及预后的关系；通过体内外实验探讨其对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响；应用通路蛋白抑制剂、RNA 干扰等技术进行CAP2-ES相关功能及机制研究，从而揭示CAP2-ES诱导乳腺癌细胞发生EMT 和侵袭转移的分子机制，为乳腺癌分子诊断和治疗提供新思路。

本项目是课题组研究CAP2在乳腺癌中表达差异以及临床意义的基础上，在构建CAP2克隆过程中发现CAP2在乳腺癌中存在新的剪切体CAP2-ES基础上展开的对CAP2-ES功能机制的研究，主要研究内容包括CAP2在乳腺癌中的表达及意义，CAP2-ES的鉴定及功能研究，CAP2-ES诱导乳腺癌细胞发生EMT的功能与机制研究，CAP2剪切方式和剪切体的筛查鉴定，乳腺正常上皮细胞和乳腺癌细胞CAP2剪切方式的比较。以及CAP2剪切机制的初步探讨。结果发现: 1，CAP2在乳腺癌中表达上调；2，CAP2表达与PR密切相关，并与乳腺癌病人生存率密切相关；3，CAP2-ES可影响EMT标志物的表达并增强乳腺癌细胞侵袭性，而CAP2对此则没有影响；4，在乳腺癌细胞中鉴定了多种CAP2剪切体，证实CAP2在乳腺癌中存在着复杂的剪切体形式；5，过表达CAP2后，在91个共表达改变的基因中，共有21个基因涉及可变剪切的调控，为涉及各种生物学进程中基因数目最多的，提示CAP2基因也可能参与了自身剪切方式的调控，值得进一步深入研究；6，证实乳腺正常上皮细胞中亦存在CAP2新的剪切体；7，CAP2在乳腺正常上皮细胞中的剪切方式以外显子跳跃为主，而CAP2在乳腺癌细胞中的剪切方式更为复杂，混合了外显子跳跃，内含子保留以及缺失等多种情况。受本基金资助课题组共发表有标注SCI收录论文6篇，有关CAP2的研究成果以大会发言形式参加广东省医学会第九次乳腺病学学术会议，获得优秀论文一等奖，参加广东省医学会第十次乳腺病学学术会议，获得优秀论文二等奖，培养硕士研究生7人；培养青年教师一名由主治医师晋升副主任医师。本研究是一项具有临床意义的创新性研究，项目的持续深入研究将为乳腺癌的分子诊断和靶向治疗提供潜在的重要研究基础，还将揭示CAP2全新的转录本剪切方式和剪切机制，具有重要意义，值得进一步进行深入研究。