PlGF在IBD血管生成和炎症中的作用及其机制

炎症性肠病（IBD）的病情不易控制且容易复发。近年发现，血管生成在IBD慢性炎症发展和持续中发挥作用。PlGF是血管内皮生长因子家族成员之一，刺激血管内皮细胞生长、迁移，在IBD病理性血管生成中起重要作用。抗PlGF抗体选择性地抑制病理性血管生成而不影响正常血管。目前尚无PlGF信号在IBD血管生成和炎症中的作用及其机制的研究。鉴于PlGF对血管的选择性作用，本课题拟行（1）临床研究：检测IBD患者血清和肠粘膜PlGF及其受体的表达变化；（2）体外研究：PlGF刺激原代培养的HIMEC，观察其对血管形成、迁移，VCAM-1、ICAM-1以及PlGF受体表达的影响；（3）体内研究：导入表达PlGF的腺病毒及抗PlGF中和抗体的方法，观察PlGF对小鼠结肠炎的作用，以及对病变组织新生血管、炎症细胞浸润的影响，探讨PlGF在结肠炎血管生成和炎症中的作用机理，为IBD的干预治疗带来新的线索。

炎症性肠病（IBD）是一种慢性复发性疾病，好发于年轻人，近年来发病率快速上升，随着时间的推移疾病逐渐进展并可出现各种并发症，严重危害健康，导致劳动能力下降和病残。IBD发病与多种因素相互作用有关，其中非免疫细胞和免疫细胞都起着重要的作用。血管内皮细胞及血管生成在IBD慢性炎症发展和持续中发挥着重要的作用。PlGF是血管内皮生长因子家族成员之一，刺激血管内皮细胞活化、增殖和迁移，在IBD病理性血管生成中起重要作用。遗传研究发现PlGF对正常人血管生成和生理血管维持是多余的，但有助于炎症和肿瘤的血管生成，促进炎症的发展，故抑制PlGF可选择性地抑制病理性血管生成而不影响正常血管。尚无PlGF信号在IBD血管生成和炎症中的作用及其机制的研究。研究发现活动性克罗恩病(CD)患者的血清PlGF水平显著升高，活动性溃疡性结肠炎的血清PlGF水平轻度升高。在活动性CD肠黏膜组织，PlGF与NRP-1表达增加。用抗CD31免疫组织化学方法标记内皮细胞，发现活动性克罗恩病肠黏膜血管密度增加，CD活动度与肠粘膜血管密度呈正相关。血清PlGF水平及肠黏膜PlGF表达亦与肠黏膜血管密度相关。体外试验发现HIMEC中PlGF mRNA呈高表达，PlGF sh RNA感染后，HIMEC的PlGF mRNA和蛋白表达受抑制，重组PlGF刺激后NRP-1的mRNA和蛋白表达上调，pERK1/2的表达也相应上调。PlGF刺激促进HIMEC迁移和小管形成，并呈浓度依赖性，但高浓度的PlGF反而抑制其迁移和小管形成；PlGF对HIMEC的增殖和细胞周期未见影响。PlGF siRNA转染的DSS结肠炎小鼠肠黏膜PlGF mRNA表达明显下调，结肠炎症明显减轻，CD31免疫组化染色发现黏膜血管密度较对照组降低，肠黏膜PlGF、NRP-1和pERK1/2表达下调。鉴于PlGF在IBD患者肠黏膜呈高表达且与血管密度正相关；PlGF刺激促进HIMEC血管生成，伴NRP-1受体及pERK1/2表达上调；抑制结肠炎小鼠PlGF表达可缓解结肠炎和血管生成，同时肠黏膜NRP-1和pERK1/2表达下调，故PlGF/NRP-1可作为分子治疗的靶点，抑制血管生成和MAPK炎症通路，为IBD的治疗提供新的探索方向。