"TLR4-MyD88-NF-κB/beclin 1"与DC免疫耐受失调介导UC机制及健脾益肠散的调节效应

溃疡性结肠炎(UC)是环境因素作用于遗传易感者，在肠道微生物参与下，由于抗原的持续刺激或(和)免疫调节紊乱，致使肠黏膜免疫系统过度亢进和难于自限的免疫炎症反应。其中"TLR4-MyD88-NF-κB"激活炎症反应、TLR4-DC免疫耐受失调和"TLR4-beclin 1/LC3"介导的细胞自噬是UC免疫失控的重要机制，这与中医"脾为之卫"功能失调相一致。本研究从"炎症-免疫耐受-自噬"失调的关键环节探讨UC的病理生理机制及中药健脾益肠散对UC模型大鼠的效应机制，运用电镜观察UC大鼠模型的结肠黏膜细胞自噬泡形态；免疫组化、Western Blot法检测大鼠结肠黏膜组织的自噬特征性蛋白Beclin 1、LC3及TLR4、NF-κB、MyD88；ELISA检测大鼠血浆TNF-α、INF-γ、TGF-β、IL-10的变化，为揭示中医"脾为之卫"的免疫学理论及健脾益肠散的作用机制提供依据。

溃疡性结肠炎(UC)是临床难治病之一，由环境因素作用于遗传易感者，在肠道微生物参与下，由于抗原的持续刺激或(和)免疫调节紊乱，致使肠黏膜免疫系统过度亢进和难于自限的免疫炎症反应。其中“TLR4-MyD88-NF-κB”激活炎症反应、TLR4-DC免疫耐受失调和“TLR4-beclin 1/LC3”介导的细胞自噬是UC免疫失控的重要机制。.本研究结果：（1）系统总结了贵州省名老中医董菲洛教授临床用药规律和特点；（2）基于肠道粘膜免疫探讨“脾为之卫”理论，阐述了其科学内涵；（3）探索了新领域：认为细胞自噬，与中医阴阳自和机制相吻合，以维持内环境的阴阳气血平衡，是探索中医药微观作用机制的新思路；（4）健脾益肠散高剂量组与柳氮磺吡啶组相比，均能有效改善UC大鼠体质量的下降、大便性状和便血情况，有效减轻大鼠结肠粘膜充血、水肿及溃疡形成，促进结肠粘膜糜烂和溃疡愈合，且该方高剂量组明显优于其中、低剂量组，提示药物剂量与效果之间有一定相关性；研究证实该方可通过减轻结肠炎症，促进结肠粘膜修复，对UC模型大鼠有较好的治疗作用。（5）健脾益肠散对UC模型大鼠的TNF-a、NF-κBp65、 IFN-γ、TGF-β1有下调作用，对IL-10有上调作用，也存在一定的量效关系，以高剂量组效果最佳；该方可增强Beclin 1和LC3蛋白表达，参与调节自噬；其对UC模型大鼠的TLR4、MyD88有下调作用，药物剂量与效果之间有一定相关性，以高剂量组效果最佳；表明该方可能是通过增强结肠组织自噬，降低TLR4 、MyD88水平，使TLR4蛋白表达减少、MyD88蛋白和mRNA表达下降，通过NF-κB信号传导途径，控制NF-κBp65抑制TNF-a的活化，减少TNF-a与炎症细胞相互作用，进而调节促炎与抗炎细胞因子动态平衡，抑制免疫系统的过度激活，纠正UC异常的免疫炎症反应，缓解肠道免疫破坏，从而促进肠黏膜修复与溃疡愈合而实现其治疗UC的作用。.本研究从“炎症-免疫耐受-自噬”失调的关键环节，运用了HE染色、电镜、免疫组化、Western Blot、RT-PCR法检测相关指标，探讨了UC的病理生理机制及中药健脾益肠散对UC模型大鼠的效应机制，揭示了中医“脾为之卫”理论的科学内涵，一定程度完善了中医免疫学理论，丰富了中医脾胃论的内容。为进一步从细胞水平探讨其科学规律奠定了坚实基础。