多层次肿瘤淋巴管内皮细胞靶向成像的实验研究

肿瘤内的淋巴管生成也是影响肿瘤转移、预后的一个重要因素，可作为肿瘤诊断、预后及疗效评价的重要指标。随着分子影像学的出现与迅速发展，为活体评价肿瘤内淋巴管生成提供了可能性，尤其是多模式成像理论及技术的出现，不但可以整合各种成像手段的优势和克服其缺陷，同时还可以获得更多的生物信息及加速基础研究成果向临床应用的转化。我们课题组结合前期工作经验，提出采用抗Podoplanin的单克隆抗体片段分别与高温热分解方法制备的聚乙二醇(PEG)包裹的超顺磁性氧化铁纳米颗粒和反相微乳液方法制备的PEG包裹的荧光量子点结合构建分子影像探针，通过活体荧光显微镜观察及磁共振方法评价动物肿瘤模型内的新生淋巴管，为肿瘤的诊治提供更丰富的影像依据，从而探索一种可作为肿瘤诊断、预后及疗效评价的新指标；并且量化比较两种分子影像探针的成像结果，为多模式成像系统及探针的研发提供先期实验基础。

肿瘤内的淋巴管生成也是影响肿瘤转移、预后的一个重要因素，可作为肿瘤诊断、预后及疗效评价的重要指标。随着分子影像学的出现与迅速发展，为活体评价肿瘤内淋巴管生成提供了可能性。本研究采用免疫组织化学方法筛选结果显示，小鼠Lewis肺癌模型内淋巴管丰富，抗LYVE-1单克隆抗体对Lewis肺癌模型内淋巴管染色明显，同时肿瘤内非特异性染色较少，背景清晰，更适合于靶向探针成像实验研究。进而采用抗LYVE-1的单克隆抗体与高温热分解方法制备的聚乙二醇(PEG)包裹的超顺磁性氧化铁纳米颗粒结合，成功构建淋巴管内皮细胞靶向分子影像探针。经体外细胞学实验显示，本项研究所合成的LYVE-1单克隆抗体耦联的顺磁性纳米颗粒（LYVE-1-PEG-USPIO）是具有特异性的淋巴管内皮细胞靶向的纳米探针，靶向特异性成像效果较好。小鼠Lewis肺癌模型在体实验显示，在注射两种纳米颗粒后的10min-12h内，LYVE-1-PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR与PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR无显著统计学差异，但在注射后24h，测量结果提示LYVE-1-PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR与PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR有统计学差异（P<0.05），LYVE-1-PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR低于PEG-USPIO组肿瘤周边区域SNR。同时肿瘤组织免疫组化和普鲁士蓝染色证实，LYVE-1-PEG-USPIO可以靶向标记肿瘤内新生淋巴管，但是分别注射LYVE-1-PEG-USPIO与PEG-USPIO两组肿瘤组织内都可见除淋巴管外的蓝染细胞结构，考虑可能为肿瘤内巨噬细胞对纳米颗粒的非特异性吞噬所致。本研究初步达到预期研究结果，即采用磁共振方法评价动物肿瘤模型内的新生淋巴管，为肿瘤的诊治提供更丰富的影像依据，从而探索一种可作为肿瘤诊断、预后及疗效评价的新指标。. 另外，在本课题支持下，还进行了一些活体荧光显微镜观察、磁共振分子影像学及骨髓间充质干细胞治疗方面相关研究。