蜜峰毒素-峰毒溶血肽Melittin基因克隆生物制剂的研究

本项研究通过从蜜蜂毒腺中分离纯化蜜蜂毒素的主要组份--蜂毒溶血肽melittin的mRNA，用mRNA→cDNA逆转录的方法，合成了Melittin的cDNA文库，并将其克隆到了筮菌体质粒λgt//上；又通过亚克隆，将melittin的基因克隆到了大肠杆菌E.coli的高效表达质粒载体PBV220上，经过PCR扩增检测，酶切分析， 以及DNA序列分析，证明将melittin基因转入了大肠杆菌之中，为melittin的微生物发酵生产打下基础。同时，又将melittin的基因克隆到来自B.cereus的质粒pBC16上，然后通过感受态转化法，将其转化到了棉花内生细菌B.c9002中，经质粒酶切分析，PCR扩增检测和DNA序列分析，证明转化成功，从而为利用重组内生细菌制剂在棉花体内杀虫提供了参考依据和方法。