东亚钳蝎镇痛活性肽AGAP在外周及脊髓水平伤害性信息调制中的作用及其机制

阿片类药物的成瘾性及非甾体类药物的消化道出血倾向，限制其在疼痛治疗中的使用。传统中药全蝎可用于治疗偏头痛、风湿痹痛及癌痛等，但其有效成份蝎活性多肽的采集困难，价格昂贵。本课题组从东亚钳蝎的毒液中分离出生物活性多肽AGAP。初步研究发现AGAP具有镇痛作用，但机制尚不清楚。申请者曾证实丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路的激活参与伤害性信息的调制。结合MAPKs在伤害性信息中的作用及蝎毒素的镇痛作用，预实验结果表明皮下或鞘内注射AGAP均能显著减轻炎性痛，并伴随外周及脊髓磷酸化MAPKs表达的改变。为进一步证明外周及脊髓水平AGAP是否会通过MAPKs介导的机制参与伤害性信息的调制，申请者拟利用行为学检测、免疫组化、免疫印迹、信号分子阻断等技术探讨AGAP在外周及脊髓水平伤害性信息调制中的作用及其机制，揭示传统中药全蝎活性多肽AGAP作用靶点，为将其开发成镇痛新药提供实验依据。

本课题探讨了东亚钳蝎蝎毒素AGAP在外周及脊髓水平伤害性信息中的作用及其机制。预先在小鼠足底或鞘内注射AGAP，采用行为学方法观察外周用AGAP 对福尔马林引起的小鼠舔足行为的影响；预先及后鞘内注射AGAP，观察AGAP对CCI引起的小鼠疼痛行为的影响。采用免疫组化及免疫印迹方法观察AGAP对福尔马林及CCI引起的p-MAPKs表达的影响，及脊髓FOS蛋白表达的改变。结果显示，预先外周或鞘内注射AGAP，抑制福尔马林引起的舔足反应，同时伴随外周及/或脊髓p-MAPKs表达的减少，且脊髓FOS蛋白的表达显著减少；预先或后注射AGAP，阻断或逆转CCI引起的疼痛行为反应，且伴随脊髓p-MAPKs及FOS蛋白表达的减少。这些研究表明AGAP通过MAPKs通路抑制急性炎性痛及神经病理性疼痛。