基于过度纤维化和神经再支配探讨电针足三里+阿是穴促进骨骼肌再生的机制

骨骼肌损伤后不完全修复是非常多见的临床病理现象，严重限制骨骼肌发挥生理功能，给损伤后治疗带来极大挑战。影响骨骼肌肌纤维再生的因素很复杂，其中瘢痕修复和失神经支配是关键因素。电针治疗骨骼肌损伤稳定，但目前对肌纤维再生的研究还是空白。受整体+局部配穴治病疗效稳定的启发，本课题以电针足三里+阿是穴组方干预腓肠肌钝挫伤模型家兔的愈合过程为研究对象，采用RT-PCR、单纤维肌电图和肌肉力学等结合的方法，进行完全随机对照研究，探讨电针控制过度纤维化和促进骨骼肌神经再支配的机理，以及对骨骼肌电生理和力学功能恢复等方面的作用规律。本课题对阐明电针促进骨骼肌再生的关键因素具有重要意义，为电针治疗促进骨骼肌再生的可行性奠定科学基础。

背景：肌肉骨骼系统损伤是意外伤害中发病率最高的一类损伤，约占到60-67%。如何促进骨骼肌损伤后的有效再生，成为目前国内外研究的热点问题。目前的治疗方法如超声波、低频率激光虽能促进骨骼肌的修复，但无减轻基质纤维化的临床证据；生长因子如IGF-1、NGF等虽能促进肌纤维再生，但应用范围局限，难以推广进行临床应用；组织工程、基因工程治疗如富血小板血浆、肌源性干细胞 等目前研究尚处于实验阶段，其临床可操作性和安全性均需要进一步的研究证实。电针治疗能够有效促进神经再生和功能恢复、抑制失神经支配骨骼肌的萎缩、促进骨骼肌损伤后再生。但目前电针促进肌纤维再生机理的研究还是空白。本研究以家兔腓肠肌钝器伤为模型，采用电针足三里与阿是穴的干预方法，进行电针促进骨骼肌再生作用和机制的研究。研究主要分为两部分：一是电针促进骨骼肌微观结构的再生，包括减轻基质纤维化（Masson染色，免疫组化GDF-8、TGF-β、P-Smad2/3）、促进肌纤维再生（HE染色，免疫组化及RT-PCR GDF-8、MHC、Vimentin）、促进神经再支配的作用及机制（AchE、Agrin）；二是电针促进宏观收缩功能恢复的作用，包括电针促进电生理属性如肌电图和神经传导速度恢复、促进生物力学属性（极限载荷、屈服载荷等）恢复的作用及机制。结论1.电针通过抑制转化生长因子（TGF-β/Smad）信号通路减轻细胞外基质纤维化；且抑制纤维化过程主要与抑制GDF-8/p-Smad2/3信号通路中GDF-8、p-Smad2/3等关键蛋白的表达有关。2. 电针通过抑制GDF-8表达从而促进肌卫星细胞的增殖、更新，促进肌纤维再生；通过促进MHC表达，促进肌纤维结构完整；通过延长vimentin的持续表达，促进腓肠肌持续再生、与基质纤维化产生竞争。3. 电针通过促进神经再支配、神经肌肉接头重建从而促进骨骼肌电生理属性恢复。而电针促进神经肌肉接头AchE、Agrin的表达就位是促进神经肌肉接头重建的关键。4. 电针通过促进肌纤维微观结构（细胞骨架、膜性结构、粗细肌丝、细胞外基质等）的恢复从而促进腓肠肌生物力学属性如极限载荷、屈服载荷的恢复。本研究对阐明电针促进骨骼肌再生的关键因素具有重要意义，为电针治疗促进骨骼肌再生的可行性提供理论依据。同时也为中医“行气活血”理论指导临床骨骼肌损伤的治疗奠定基础。