静脉移植转染Cbfa1基因的异体MSCs重建缺血性股骨头坏死血运的研究

本课题主要利用基因工程技术和干细胞移植血管再生技术进行缺血性股骨头坏死后血运重建研究，探索一种便捷、有效而又经济的缺血性股骨头坏死治疗方法。首先用Cbfa1基因转染MSCs，观察其对MSCs向成骨细胞分化及体外"迁移"能力的影响。再将不同浓度的异体MSCs静脉输入动物体内，确定细胞移植的安全浓度、观察有无急慢性免疫排斥反应及对缺血性股骨头坏死动物自体MSCs活性的影响。最后将转染Cbfa1基因的异体MSCs静脉植入缺血性股骨头坏死动物模型，运用实时荧光定量PCR、Western blotting分析、原位杂交、GFP标记等方法观察股骨头缺血坏死区MSCs的数量及成骨活性变化、毛细血管和新骨的再生情况及不同时相点各种生长因子表达的时效关系，以揭示Cbfa1基因增强MSCs定向"归巢"股骨头缺血坏死区的作用机制并明确其重建股骨头缺血坏死区血运的能力，为治疗缺血性股骨头坏死提供新思路和理论依据。