用RNAi技术抑制MIF表达对动脉粥样硬化进程的影响

克隆、测定新西兰兔巨噬细胞移动抑制因子（MIF）全长cDNA序列，运用工具软件选择4个潜在的小干扰RNA（siRNA）的靶序列和1个非siRNA靶序列（对照）,制备小RNA对应的模板DNA，分别插入自主构建的含RNA聚合酶Ⅲ启动子的腺病毒穿梭质粒pAdGFP-Pol，与腺病毒骨架质粒在大肠杆菌BJ5183中重组为腺病毒质粒，转染293细胞，包装成重组腺病毒。将重组腺病毒转染可表达MIF的培养的新西兰兔血管内皮细胞和巨噬细胞，测定细胞中MIF表达的变化。选择能最有效抑制MIF表达的重组腺病毒，静脉注射新西兰兔动脉粥样硬化（AS）模型，鉴定重组腺病毒转录的siRNA抑制MIF表达的作用及MIF表达降低对AS发生、发展的影响。.本项目将为防治AS探索新的途径，并为研究疾病相关基因的功能、疾病发生的信号转导途径和基于RNAi的基因治疗药物提供技术平台。