钙池操纵性钙通道参与巨噬泡沫细胞形成及机制

已有资料表明ox-LDL可诱导巨噬细胞胞内钙浓度升高，但何种途径介导了[Ca2+]i升高及其对细胞泡沫化有何影响，尚不清楚。我们前期工作发现ox-LDL引起巨噬细胞钙内流不依赖于电压敏感钙通道，而钙池操纵性钙通道（SOCC）阻断剂可阻断ox-LDL诱导的[Ca2+]i升高。进一步研究发现，SOCC阻断剂能显著抑制细胞的泡沫化和细胞对胆固醇的摄取。鉴于Orai1已被证实是构成淋巴细胞和内皮细胞等SOCC的重要分子基础。因此，本实验拟在明确Orai1与巨噬细胞SOCC关系的基础上，探讨Orai1在ox-LDL引起胞内钙浓度升高以及巨噬细胞泡沫化过程中的作用，并研究其分子机制。并进一步在apoE基因敲除小鼠观察SOCC阻断剂对动脉粥样硬化形成的影响。该研究工作将较系统的认识SOCC在巨噬细胞泡沫化和动脉粥样硬化形成中的作用及可能机制，为评估SOCC是否可作为防治动脉粥样硬化的新靶点提供实验室依据

动脉粥样硬化是炎症反应启动的脂质沉积性疾病。炎症反应和细胞泡沫化是动脉粥样硬化发生的关键环节。但详细的发病机制尚不清楚。本研究中，我们发现：①胞浆Ca2+浓度升高参与了巨噬细胞的泡沫化过程，泡沫化过程中细胞胞浆Ca2+浓度主要由orai1钙通道介导，而与电压依赖性钙通道无关。orai1介导的钙内流主要通过Ca2+-calcineurin-ASK1-JNK/p38 MAPKs信号通路上调清道夫受体SR-A的表达，增加巨噬细胞摄取脂质的能力，进而促进泡沫化过程。在体研究结果显示，尾静脉注射orai1 siRNA腺病毒或腹腔注射orai1钙通道的阻断剂（SK&F96365和人参皂甙Rd）均可明显抑制apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成。上述资料表明orai1钙通道是防治动脉粥样硬化的新靶点。②巨噬细胞泡沫化过程中microRNA-155的表达显著升高。腺病毒转染microRNA-155可明显抑制清道夫受体SR-A和CD36的表达，显著抑制巨噬细胞摄取脂质的能力；相反，microRNA-155抑制剂则增加清道夫受体SR-A和CD36的表达，促进巨噬细胞摄取脂质。提示调控microRNA-155的表达是治疗动脉粥样硬化的新策略。③eNOS是microRNA-155的直接调控靶点。促炎细胞因子可通过上调microRNA-155的表达，降低eNOS的表达，抑制NO的生成和内皮依赖性舒张反应。他汀类药物主要通过抑制microRNA-155的表达，改善内皮功能障碍。提示microRNA-155是改善内皮功能不全的新靶点。