基于双分子荧光互补原理的肉毒毒素活性传感器研究

肉毒毒素是由厌氧的梭狀杆菌所分泌的一种毒性很强的神经外蛋白质毒素，根据其抗原性，有A、B、C（1，2）、D、E、F、G等七个类型。肉毒毒素的活性与类型鉴定，在保障食品安全，医用肉毒毒素的质量控制，确定可能的生物恐怖威胁，肉毒中毒的诊断等方面有着非常重要的作用。标准的小白鼠腹腔注射法有时间长、成本高、难操作等缺点。发展中的快速测定活性方法主要是测定肉毒毒素与人工合成多肽底物反应后的产物，需要质谱等昂贵的设备，分析成本高。本申请拟构建一种双分子荧光互补（BiFC）传感器来检测肉毒毒素活性，该传感器为将肉毒毒素的特异多肽底物融合到荧光蛋白质的C-和N-片段之间，当肉毒毒素切断多肽后，C-和N-片段不能互补，荧光减少。该方法有快速、简便、灵敏、不需要复杂仪器设备等优点，可能发展成为快速测定肉毒毒素活性的新技术,具有重要的学术意义与应用价值。