NADPH氧化酶介导的活性氧信号途径在血府逐瘀汤促进血管新生中的作用机制研究

治疗性血管新生是目前治疗缺血性疾病如缺血性冠状动脉心脏病等的研究前沿。活血化瘀经典方――血府逐瘀汤具有良好的促血管新生作用；其在临床上的应用和优化，有赖于对该作用生物学机制的深入认识和新靶分子的确定。目前发现，NADPH氧化酶及其介导的活性氧在血管新生中起决定性调节作用，但其在活血化瘀中药促血管新生中的机制还不清楚。本项目以人微血管内皮细胞为模型，分析血府逐瘀汤对内皮细胞活性氧产生、NADPH氧化酶表达和活性的影响，确定该方促血管新生作用与NADPH氧化酶信号途径的相关性。再分别利用专一性抑制剂和RNA干扰技术降低该过程中内皮细胞NADPH氧化酶的活性，评价该酶对细胞血管新生反应的影响，分析相关信号通路，阐述其在血府逐瘀汤促血管新生中的作用机制。这一研究可初步揭示血府逐瘀汤调控血管新生的作用机理，为活血化瘀法临床治疗缺血性疾病提供科学依据，确立新的生物学靶点。

治疗性血管新生是目前治疗缺血性疾病的研究前沿。活血化瘀经典方――血府逐瘀汤具有良好的促血管新生作用，其在临床上的应用和优化，有赖于对该作用生物学机制的深入认识和靶分子的确定。国内外许多研究表明，NADPH氧化酶（NOX）及其介导的活性氧（ROS）在血管新生中起决定性调节作用，但其在血府逐瘀汤促血管新生过程中的分子机制还不清楚。.本项目以人内皮细胞为模型，分析血府逐瘀汤对内皮细胞血管新生的影响和作用机制。结果表明：（1）血府逐瘀汤对内皮细胞迁移、黏附和体外成血管能力有适度促进作用。（2）血府逐瘀汤干预处理可刺激内皮细胞NOX酶活性，促进NOX依赖性ROS产生。NOX专一性抑制剂或ROS特异性清除剂预处理能显著抑制血府逐瘀汤对内皮细胞迁移、黏附和体外成血管的促进效应。（3）血府逐瘀汤干预可上调人内皮细胞nox2基因转录和蛋白表达水平。利用siRNA介导基因沉默技术特异性下调人内皮细胞nox2基因表达，可抑制血府逐瘀汤对细胞NOX酶活性、ROS产生、细胞迁移、黏附和体外成血管的促进效应。同时，血府逐瘀汤可调节受体酪氨酸激酶磷酸化相关信号途径。.这一研究揭示了血府逐瘀汤通过调节NOX及其介导的ROS信号调控血管新生的分子作用机理，为活血化瘀法临床治疗缺血性疾病提供科学依据，确立新的生物学靶点。