同位素标记固相试剂/质谱技术及在蛋白质差异表达分析上的应用

本课题在现有研究的工作基础上欲设计制备一系列同位素标记固相试剂，进行试剂的筛选和研究方法的建立完善，并将其应用于基于质谱的蛋白差异表达分析研究中。此类同位素标记固相试剂的制备可以利用肽固相合成方法来完成，试剂中的活性基团为碘乙酰基，选择性地与肽段中半胱氨酸的巯基侧链共价结合，达到标记肽段与未标记肽段的有效分离，在后续的MS/MS分析研究中标记部分分子量较小便于数据库搜索，在肽段标记过程中反应所要求的溶液条件与蛋白酶解缓冲溶液保持一致，标记肽段的回收在较温和的条件下完成并获得较好回收率，有效克服ICAT、ALICE试剂和含碘玻璃珠试剂的弊端。建立完善此类试剂的应用方法并将其应用于正常与病态细胞中蛋白差异表达分析中，将为找到直接与特定生理或病理状态相关的分子提供科学依据，进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。