玉米根细胞质膜铁氮转运蛋白的基因克隆与鉴定

根据已知有关氮铁转移蛋白基因的保守序列，设计引物，通过RT-PCR，从小麦玉米的总RNA获得其基因片段，再应用RACE（未端快速扩增法）成功获得小麦高亲和力NO3（-）转移蛋白基因全长序更TaNRTI。此基因152bp(507aa)，蛋白分子量为55.2KD，等电点为8.57，共有12个跨膜域。与稻麦核苷酸同源性77-90%。进行Northern实验证明，该基因受低浓度NO3（+）诱导，高浓度NO3（+）其表达反而下降。诱导后4h表达最强，从玉米获得329bp高亲和力NH4(+)转移基因片段（zmAMT），与拟南芥水稻核苷酸同源性分别为53%和45.5%，分析证明其氨基酸有跨膜域。实验证明，N饥饿后供NH4(+),3小时被诱导表达。