环磷酸腺苷应答元件结合蛋白对起搏心室肌电重构的调控

心脏电重构是致心律失常的重要基础，然而，促发电重构的分子机制至今未明。最近发现磷酸腺苷应答元件结合蛋白（CREB）在心脏T波记忆中具有调控作用，因此，其很有可能是心脏电重构的一个新的干预靶点。本项目针对临床心室起搏后电重构促发心衰的现象，以三度房室传导阻滞犬模型为研究对象，以在体3层心肌单向动作电位时限和跨室壁复极离散、体表心电图上QT间期和Tp-Te间期为研究指标，观察心室不同部位（右室心尖部起搏、左室起搏以及双心室起搏）起搏时CREB、磷酸化的CREB蛋白的变化，并进一步应用反义核酸技术，实现CREB分子功能的阻断，观察心室起搏心电重构的变化，解析其对心脏电重构的作用。开展此项研究，不仅可望在心脏电重构分子生物学机制方面取得重要进展，而且还可能对作用于电重构的治疗靶点提供一个崭新的思路。

目的 本项目通过对心室不同部位起搏，观察心肌电重构变化、 cAMP应答元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)差异性的表达以及CREB相关通路的研究，探索CREB信号转导通路在心电重构中的关键作用。.方法 1. 在DSA下对beagle犬行永久起搏器植入术及希氏术射频消融术，建立起搏依赖的完全性III度房室传导阻滞的动物模型，根据起搏部位的不同，分为右室起搏组（右室心尖部），左室起搏组（左室侧后壁）及双心室起搏组（右室心尖部+左室侧后壁组）。2.通过多普勒超声心动图、体表心电图、血浆脑钠肽水平动物模型进行为期四周的随访。3. 4周后取心脏，行心肌病理检查及用western blot技术对心肌中ERK1/2、p38 MAPK 及CREB的表达进行检测。.结果 1.在探索建立三度房室传导阻滞模型时，经股动脉在左室消融消融希氏束电位的方法成功率明显高于经股静脉在右心室消融希氏术方法（Ｐ＜0.05），术中并发症更少（Ｐ＜0.05）。2. 左心室起搏组、右心室起搏组、双心室起搏组三组模型心脏结构上未见明显差异（P>0.05），血浆脑钠肽水平未见明显差异（P>0.05），但在心电图Tp-Te间期上却有明显差异，双心室起搏组、Tp-Te间期较其他两组明显缩短（P<0.05）。3. 三组模型的心肌病理切片未见明显差异（P>0.05）。4.Western blot结果示双心室起搏组心肌的磷酸化ERK1/2、p-38MAPK表达上较左室起搏组及右室起搏组稍有下降，而在P-CREB表达上稍有上升。.结论 经股动脉途径射频消融希氏术建立永久性房室传导阻滞模型优于传统经股静脉途径。 Tp-Te作为心电图上监测电重构的客观指标，我们发现起搏依赖心脏起搏发生了心肌发生电重构，与单心室起搏组比较，双心室起搏组发生电重构的程度小，双心室起搏组通过降低磷酸化ERK1/2及p-38MAPK表达，增加CREB的磷酸化，减轻了心肌电重构。通过本研究，验证了CREB在抑制心肌电重构方面发挥重要作用，同时本研究也证明了相对于单心室起搏，双心室起搏能缓解心脏起搏所带来的电重构，为临床上心脏同步化治疗提供一个崭新的思路。