IL-10调节滤泡辅助T细胞抑制类风湿性关节炎高亲合力自身抗体分泌的实验研究

产生高亲合力自身抗体是类风湿性关节炎患者器官病损的主因。研究证实IL-10具明显的B细胞共刺激作用，但IL-10缺失加剧自身免疫条件下高亲合力自身抗体的产生。该机制未明。因滤泡辅助T细胞(Tfh)是辅助B细胞反应最关键的细胞，本课题拟研究IL-10是否通过调控Tfh实现调节自身抗体的产生。课题以胶原诱导的关节炎为模型，首先观察IL-10信号缺失模型小鼠自身抗体水平、引流淋巴结生发中心形成与Tfh数量的关系。再通过体内外诱导实验及T-B细胞共培养，观察IL-10信号对Tfh分化、表型特征、细胞因子表达及辅助B细胞增殖、抗体类型转换、体细胞高频突变的影响，明确IL-10通过何种方式调节Tfh辅助B细胞反应。最后研究CD4+T细胞IL-10受体下游信号转导通路，明确IL-10调节Tfh分化与功能的可能机制。该研究不仅为临床治疗RA提供新的干预靶点，也有利于了解Tfh分化调控机制。

产生高亲合力自身抗体是导致包括类风湿关节炎在内的多种系统性自身免疫性疾病的重要原因。已有的研究已证实B细胞产生高亲合力的 IgG类抗体须在次级淋巴器官的生发中心接受T辅助细胞的辅助，目前已明确该类细胞为滤泡辅助T细胞（Tfh），对于控制B细胞分化、抗体类型转换和亲合力成熟具有重要作用。然而目前对Tfh细胞的分化调节机制尚不清楚。在本资助项目中，我们借助IL-10信号缺陷小鼠，发现IL-10对Tfh的分化与功能具有重要的调控作用。IL-10信号缺陷小鼠来源的Th细胞较野生型对照具有明显的促B细胞增殖与抗体分泌功能，在体动物实验亦表明IL-10信号缺陷导致胸腺依赖抗原免疫小鼠次级淋巴器官内Tfh细胞增多，功能增强，表现为细胞因子分泌能力增强及促B细胞分泌抗体能力增强。这种Tfh的增多可能与抗原递呈细胞的功能增强有关。与此同时，我们还发现IL-10缺陷自发形成肠炎时亦存在功能异常的Tfh在派氏淋巴滤泡中集聚。通过构建胶原蛋白免疫诱导的小鼠RA模型，我们发现在疾病状态下，IL-10仍能抑制Tfh的分化与功能，减少自身抗体的表达水平，减轻疾病的严重程度。这一研究结果说明IL-10是调节Tfh分化和功能的重要因素。其结论不仅解释了为什么IL-10缺陷的系统性自身免疫性疾病动物模型会产生较野生动物模型更高自身抗体水平的原因，而且对于设计疫苗免疫策略提供了理论与实践基础。