Substance P调控表皮δγT细胞分泌NGF促进创面愈合的作用和机制研究

Accumulating evidence show that dendritic epidermal T cell (γδT cell, DETC) plays an essential role in the wound healing process, but the underlying mechanisms behind it remain unclear. Based on our previous findings that Substance P activates γδT cells, and recently, γδT cells have also been demonstrated that they exert endocrine effects. However, how substance P modulate γδT cell to promote wound healing needs further investigation. Thus, we hypothesis that substance P activate γδT cell to exert endocrine effects, thereby to promote wound healing. To clarify this issue, here, by knockout mice, skin organ culture model, etc, we aim to investigate that the potential role and the underlying mechanisms of Substance P on the production of NGF by γδT cells to promote wound healing. These findings will uncover a novel mechanism of neuro-immuno-endocrine modulation in the wound healing and provide a potential therapy for the treatment of wound.

创面愈合是一个极其复杂过程。树突状表皮T细胞(γδT细胞)具有促进创面愈合的重要作用，但其具体作用机制仍知之甚少。我们前期研究表明皮肤神经末梢递质Substance P具有促进γδT细胞活化作用，而最近研究提示这种活化的γδT细胞可以发挥内分泌作用，但Substance P是否调控γδT细胞参与创面愈合还有待进一步探讨。为此，我们提出假说，在皮肤创面损伤刺激下诱发神经末梢释放Substance P，进而激活γδT细胞发挥内分泌作用，通过神经-免疫-内分泌轴调控角质细胞促进创面愈合。为了验证这一假说，我们将利用基因敲除小鼠等工具，细胞、组织(共)培养等方法和技术，从体内、体外两个角度，分别在分子、细胞、整体等不同水平探讨Substance P调控γδT细胞促进创面愈合的作用和机制。本研究将从神经-免疫-内分泌轴这一新视点为揭示创面愈合的发生机制奠定基础，为临床创面愈合防治提供新的思路。

背景：创面愈合是一个极其复杂的过程。愈来愈多的研究表明神经-免疫-内分泌学说在创面愈合中发挥重要作用，但其具体的作用和研究机理目前仍不十分明了。本研究的主要目的是研究神经递质P物质对树突状表皮T细胞的作用和其可能的作用机理，从而探讨P物质在创面愈合中的作用。.研究内容：本课题主要采用体外新鲜分离的树突状表皮T细胞，7-17 T 细胞和PAM21细胞系，通过体外培养、RT-PCR、western blotting、酶联免疫吸附和免疫荧光分析等方法从分子、蛋白、细胞等不同水平探讨P物质调控树突状表皮T细胞合成、分泌神经生长因子从而调控角质细胞的活动。.重要结果：神经激肽受体(NKRs)不仅可以在树突状表皮T细胞中表达，而且在不同部位树突状表皮T细胞的表达不同亚型。表皮的树突状表皮T细胞以I型树突状表皮细胞表达为主。P物质不仅可以活化树突状表皮T细胞使其形态发生变化，而且还可以促进其表面的CD69分子表达并分泌神经生长因子。P物质通过细胞表面的NK1R受体刺激树突状表皮T细胞分泌神经生长因子需要依赖T细胞受体突进。P物质刺激树突状表皮T细胞的这种分泌活动还可以促进角质细胞的迁移和增殖。最后，我们发现P物质刺激树突状表皮T细胞分泌神经生长因子的分子机制可能与激活ERK1/2通路有关。.科学意义：基于P物质调控树突状表皮T细胞合分泌神经生长因子促进角质细胞的作用，初步探讨了神经-免疫-内分泌这一学说如何在调控创面愈合过程中的作用。这一发现为未来临床创面愈合防治提供了重要的新的思路。