核基因Tribble3调控MAPK信号通路在糖尿病肾病中的作用及机制

糖尿病肾病已成为我国终末期肾病的主要原因之一。糖尿病肾病发病机制复杂，其具体的细胞分子水平的发病机制仍在不断的探索中。TGF-β1/Smad信号通路活化被认为是引起糖尿病肾小球硬化和细胞外基质沉积的主要发生机制。我们在综合分析了高血糖引发糖尿病肾病的诸多分子机制以及相关信号转导途径的基础上，提出Tribble3可通过调控MAPK信号传导途径直接参与或间接通过调控TGF-β1/Smad通路活性参与糖尿病肾病的进程。本项目拟从临床试验，细胞实验及动物实验三个层面，通过分子生物学、细胞生物学、实验动物学等研究方法探讨糖尿病肾病中Tribble3对MAPK和TGF-β1/Smad两条信号通路活性的调控作用，以及对糖尿病肾病进程的影响。本研究结果不仅能够促进对Tribble3基因生物学功能的认识，更重要的是有助于进一步阐明糖尿病肾病发病的分子机制，为临床防治糖尿病肾病提供新的理论依据。

本实验基本按照预定研究方案对Tribble3在糖尿病肾病发病机制中的作用做了系统研究。.第一部分中我们首先对db/db小鼠作为糖尿病肾病模型鼠的可靠性做了确认，进而利用病理学、免疫组织化学、RT-PCR及western blot等技术对Trb1、Trb2、 Trb3以及MAPK信号通路相关分子做了基础研究，最后确认Trb3、ERK1/2在db/db小鼠模型中表达改变明显，可能与糖尿病肾病的发生发展相关。.第二部分我们进一步通过细胞实验进一步确认系膜细胞在高糖环境下ERK1/2通路活性增加，TGF-β1表达上调，分泌的胶原纤维明显增加。通过siRNA技术抑制Trb3表达可以下调ERK1/2通路活性，进而影响TGF-β1及胶原纤维的表达。.对于原定方案中的通过强化活体db/db鼠Trb3表达观察糖尿病肾病进展的变化由于技术原因未能实现。我们发现注射Ad5-trb3并未对活体产生任何影响，因此我们认为向活体注射腺病毒为载体的目的基因转染效率低下，不能够对机体产生有效的影响。.通过该研究我们初步明确了Tribble3在糖尿病肾病中的作用及可能机制。通过该研究我们培养了1名硕士研究生，目前已在中文期刊发表文章1篇，SCI论文以撰写完毕，目前正处于投稿中，尚未确认接收。