NOD样受体和RIG-I样受体介导的嗜碱性粒细胞和支气管上皮细胞的活化作用在过敏性哮喘发病机制中的研究

过敏性哮喘是常见慢性炎性疾病，发病率在中国呈增长趋势。呼吸道感染可加重过敏性哮喘病人的气道炎症反应。机体对细菌和病毒感染的先天免疫反应主要通过模式识别受体(PRRs)介导。NOD样受体(NLR)和RIG-I样受体(RLR)是细胞内关键PRRs。NLR 家族成员NOD1识别所有革兰氏阴性菌和某些革兰氏阳性菌胞内肽聚醣片断，而NOD2则识别所有细菌胞壁酰二肽。RLR是细胞内解螺旋酶以识别病毒双链RNA片断，诱导α 和β干扰素产生，因而在抗病毒感染中起关键作用。我们前期研究表明PRRs Toll-样受体(TLR)在过敏性炎症中嗜酸性粒细胞活化起重要作用，但NLR和RLR介导先天免疫应答与过敏性炎症的联系，及调节这种联系的细胞内信号途径并不清楚。嗜碱性粒细胞是过敏反应的关键效应细胞, 本研究拟阐明NLR和RLR介导的嗜碱性粒细胞和支气管上皮细胞的活化作用,并探索调节它们相互作用的细胞内信号通路。

吸呼道细菌感染会加重气道炎症。胞质中NOD2是NLR家族成员之一，能识别几乎所有细菌中结构保守的肽聚糖组分胞壁酰二肽。本项目对NOD2配体胞壁酰二肽介导的共培养的人嗜碱性粒细胞与人原代支气管上皮细胞的活化作用进行了研究。细胞因子的释放，NOD2蛋白，粘附因子及细胞内信号分子的表达主要通过ELISA或流式细胞技术进行检测。实验表明，NOD2蛋白在人外周血嗜碱性粒细胞，碱性粒细胞系KU812，人原代支气管上皮细胞及人支气管上皮细胞系BEAS-2B中均有表达。在共培养体系中，嗜碱性粒细胞用IL-33预先刺激与否，胞壁酰二肽都能显著增强嗜碱性粒细胞与支气管上皮细胞表面粘附因子（细胞间粘附因子ICAM-1 及血管细胞粘附因子VCAM-1）的表达 (p < 0.05)。同时，胞壁酰二肽能显著促进共培养体系中细胞因子IL-6，趋化因子CXCL8及由上皮细胞衍生的抗菌肽β-防御素2的释放。研究发现，在胞壁酰二肽刺激下，支气管上皮细胞是共培养体系中释放IL-6，CXCL8及β-防御素2的主要来源。细胞表面粘附因子ICAM-1和VCAM-1的表达及细胞因子IL-6，CXCL8的释放被不同信号分子化学抑制剂所抑制，结果表明，嗜碱性粒细胞与支气管上皮细胞的相互作用受细胞内MAPK信号通路及核转录因子调节。本研究为嗜碱性粒细胞在先天免疫中的作用， 呼吸道细菌介导的先天免疫反应与气道过敏性炎症之间的重要联系及随后的气道过敏性炎症加重提出了新的科学依据。