毛白杨花组织特异性启动子的分离与功能鉴定

本研究以我国特有的毛白杨为试材,分别构建雌雄花芽和花序混合cDNA文库；采用竞争性杂交法筛选cDNA文库,获得毛白杨雌雄花组织特异性表达的cDNA；将这些cDNA克隆、测序并根据其序列设计特异引物，利用不平衡PCR和反向PCR技术从基因组DNA中获得花组织特异性启动子；通过缺失突变确定启动子的有效功能区,替换pBI121中的35S启动子构建表达载体；通过农杆菌介导转化烟草等，获得转基因烟草植株；进行PCR、Southern检测，并进行GUS基因表达特性分析，对毛白杨雌雄花组织特异性启动子特性进行评价。本研究填补了杨树花组织特异性启动子研究的空白。不仅可为毛白杨遗传工程提供有价值的启动子，而且对于阐明毛白杨开花调控的分子机制和开展转基因树木安全性研究具有重要的科学意义。同时对于解决毛白杨结籽率低、花粉育性差、散粉飞絮污染具有重要的现实意义，对杨柳科、悬铃木等树种的相关研究具有较高借鉴价值。