子宫内膜细胞脂肪酸结合蛋白4在胚胎着床中的作用与机制研究

胚胎着床是生殖的关键性控制环节，着床失败是早期妊娠丢失的主要原因。胚胎着床受到激素、细胞因子、生长因子等组成的分子网络的精细调控，但其机制远未阐明。我们发现子宫内膜细胞表达脂肪酸结合蛋白4（FABP4，常被称为aP2），分泌中期内膜表达显著增高，蜕膜aP2进一步增高；而且，阻断aP2功能显著抑制子宫内膜细胞增殖，显著抑制胚胎与子宫内膜的粘附率。本项目利用临床标本，进一步阐明子宫内膜aP2的时序表达与分布，明确雌、孕激素对aP2的调控效应；利用体外胚胎粘附模型和模式动物，确定aP2在体内外对胚胎着床、发育的影响；以人原代子宫内膜细胞和细胞系为基础，观察aP2对内膜细胞生物学功能、容受性、脂肪摄取与转运、炎性因子表达的影响以及PPARγ通路、IKK-NFκB通路在aP2调控与效应中的作用，明确aP2对胚胎着床、发育的影响及机制。研究结果将有助于揭示生殖奥秘，改善妊娠结局，保护生育力。

胚胎着床是生殖的关键性控制环节，着床失败是早期妊娠丢失的主要原因之一。胚胎着床受到激素、细胞因子、生长因子等组成的分子网络的精细调控，但其机制远未阐明。通过课题的实施，我们发现：（1）子宫内膜组织表达脂肪酸结合蛋白4（FABP4），分泌中期（围着床期）子宫内膜FABP4表达水平显著高于增殖期，妊娠后，子宫内膜蜕膜化，FABP4表达进一步增高；免疫组化显示，FABP4表达于增殖期子宫内膜的腺上皮细胞和分泌期内膜的腺上皮和间质细胞，荧光免疫化学显示子宫内膜细胞（Ishikawa和RL-952）表达FABP4；子宫内膜细胞FABP4表达水平受E2和P的调控。（2）实时定量荧光PCR显示，早期自然流产孕妇蜕膜组织FABP4 mRNA表达水平显著低于正常妊娠孕妇的蜕膜组织。（3）siRNA靶向性干扰FABP4表达或特异性抑制剂抑制FABP4功能显著降低子宫内膜细胞的增殖、迁移和浸润能力，并降调E2和P诱导的子宫内膜容受因子LIF、Integrin β3和Claudin4 的表达。（4）在胚胎着床动物实验中，siRNA靶向性干扰FABP4或特异性抑制FABP4显著减少胚胎着床数；在体外胚胎粘附实验，siRNA靶向性干扰FABP4或特异性抑制FABP4显著抑制胚胎粘附率。上述发现提示：子宫内膜FABP4通过调控细胞功能和容受性，影响胚胎粘附和着床，从而参与胚胎着床过程。（5）在完成研究计划的基础上，课题组测定了子痫前期与正常妊娠胎盘中FABP4水平，发现子痫前期孕妇胎盘FABP4表达量显著升高；体外细胞实验中，siRNA靶向性干扰FABP4或特异性抑制其功能显著抑制人滋养细胞（Swan-71 和Jar）的增殖、迁移、侵袭能力，提示FABP4可能与子痫前期的发病有关。