抗HIV多肽的定点糖基化修饰及活性研究

结合有机合成与酶促合成技术，对抗HIV多肽药物T-20（商品名:Fuzeon）及本单位前期开发的新型HIV抑制多肽HR212进行定点糖基化修饰和活性研究。T-20和HR212都存在体内半衰期短、稳定性差等多肽药物的缺陷，本项目以获得药效长、稳定性高的抗艾滋多肽为目标，拟通过定点突变或合成在多肽的非活性域引入可被选择性修饰的氨基酸位点，以温和的反应条件在该位点偶合导入糖基修饰剂，旨在建立简单、高效的抗艾滋多肽定点糖基化修饰方法，并研究多肽修饰物的活性及作用机制，考察其药代动力学行为。本项目的完成可为研制具有广阔应用前景的长效抗艾滋多肽药物提供理论基础和技术支撑，有助于解决多肽药物化学修饰技术中的（1）多点随机修饰导致的产物活性降低、成分复杂、纯化困难；（2）修饰反应条件剧烈导致的多肽构象变化以致失活等瓶颈问题。这对提升我国多肽类药物的研究水平具有重要意义。

本项目主要对抗HIV多肽T-20进行了糖基化和聚乙二醇（PEG）化修饰，并获得了长效的抗HIV潜在药物。组合有机合成和酶促合成技术，获得了四种定点糖基化多肽和四种定点PEG化多肽，通过体外抗HIV活性筛选，获得了三种活性保留的N端修饰肽（LacCF-37，SiaLacCF-37和PEG2KDCF-37），并对这三种多肽进行了大鼠体内药代动力学研究。结果表明，糖基化和PEG化均可明显延长药物体内半衰期，LacCF-37，SiaLacCF-37和PEG2KDCF-37大鼠体内半衰期分别是T-20的2.8、15.5和10.8倍。本研究为进一步开发长效抗HIV多肽药物打下了基础。本研究已发表SCI论文一篇（Carbohydrate Polymer，2014，Accepted），申请专利两项（一种PEG化多肽及其制备方法和其应用，申请号：201310706149.7；一种糖基化多肽及其制备方法和其应用，申请号：201310704596.9），与专利相关的论文正在投稿中，达到了预期目标。