miR-146b-3p对胰腺癌干细胞恶性生物学行为的调控及其机制研究

胰腺癌干细胞在胰腺癌的发生、发展中起着决定性作用，要攻克胰腺癌必须彻底杀灭胰腺癌干细胞，而加强其分子机制的研究是关键所在。我们运用基因芯片技术证实miR-146b-3p在胰腺癌干细胞中低表达，增强表达后发现Hedgehog信号通路关键蛋白MAP3K10被抑制表达，DYRK2增强表达。以上结果提示miR-146b-3p在胰腺癌干细胞恶性生物学行为维持中可能起着重要作用。本项目拟在前期基础上进一步研究：①构建慢病毒载体过表达miR-146b-3p，验证胰腺癌干细胞恶性生物学行为的变化；②运用荧光报告素酶验证miR-146b-3p和MAP3K10/DYRK2靶向关系；③免疫共沉淀技术阐明miR-146b-3p/MAP3K10/DYRK2与Hedgehog信号通路的关系及其对胰腺癌干细胞恶性行为的影响。该项目有望进一步阐明胰腺癌干细胞恶性行为的分子生物学机制，并为新的治疗靶点和新药开发打下基础。

胰腺癌病人恶性程度高，病人预后差，研究表明胰腺癌的恶性行为是由于早期局部的侵袭和远处转移以及对放化疗的耐受性。越来越多的研究表明，人胰腺癌干细胞能促进肿瘤的侵袭和化疗耐受。文献报道，传统的化疗不但不能杀死胰腺癌干细胞，反而会增加和富集胰腺癌干细胞。越来越多的文献报道提示，异常的miR表达谱与胰腺癌干细胞的失调有关，但是仅仅有文献研究miR-34a与胰腺癌干细胞的关系。研究miR对了解胰腺癌干细胞背后的关键基因具有重要意义。. 本研究中，我们从2例种植瘤中分离出了CD24+CD44+ESA+的胰腺癌干细胞并用芯片从基因组层面探索了其mRNA和miR的表达谱。我们发现，一些基因涉及了TGF-β and p53信号通路，并且miR-146b-3p是其中下调最显著的，且在胰腺癌干细胞中表达有差异的。然后，我们阐述了miR-146b-3p调节肿瘤干细胞富集的胰腺癌细胞系mia paca-2的细胞生长和肿瘤形成，但是并不调节肿瘤干细胞不富集的胰腺癌细胞系bxpc-3。并且，我们确认了miR-146b-3p直接靶向MAP3K10，该基因能调控HH通路。上述结果为深入了解胰腺癌干细胞的分子机制提供新的视角且助于开发新的胰腺癌化疗方案。