Lin28B介导的肿瘤相关性炎症诱导肠上皮细胞转化的实验研究

Colon cancer is a malignant tumor associated with inflammation, and inflammation promotes the development of colon cancer. However, the mechanism is largely unknown. Our previous study found, for the first time, that Lin28B, a proto-oncogene, highly expressed in normal intestinal tissue adjacent to colon cancer, and there are a large number of inflammatory cells infiltration in the junction between tumor tissue and normal tissue. Based on our finding and related literatures, we propose that inflammatory cells are recruited into the surrounding of colon cancer tissue by cancer cells, and lead to the cancer-related inflammation there, which contributes to normal tissues adjacent to cancer cells expressing Lin28B and consequently inducing malignant transformation of these cells and accelerating tumor development. To test our hypothesis, we will demonstrate that " inflammatory reaction -NF-κB-Lin28B" axis is the mechanism of Lin28B highly expressed in intestinal cells adjacent to cancer cells by using chemotaxis assay, co-culture experiments, the correlation analysis of the expression of inflammatory cytokines, NF-κB and Lin28B in human and murine colon carcinoma specimens. We will also detect the effect of Lin28B over-expression on the malignant transformation of intestinal cells through soft agar colony formation assay in vitro and tumorigenesis in vivo. And finally, we will explore if both of Lin28B expression in intestinal cells and tumor development could be inhibited by blocking the inflammatory response. This study potentially shed light on our understanding of tumor development and provides new strategies and targets for cancer prevention and therapy.

结肠癌是炎症相关性恶性肿瘤，炎症促进结肠癌发展，但机制不清。我们前期研究首次发现原癌基因Lin28B在结肠癌组织毗邻的正常肠上皮细胞中高表达，并发现肿瘤组织和正常组织交界处有大量炎细胞浸润。结合相关文献，我们提出肿瘤细胞通过募集炎细胞至结肠癌组织周围而引发肿瘤相关性炎症反应，并诱导癌组织毗邻的正常细胞表达Lin28B，进而促使这些细胞发生恶性转化而加速肿瘤发展的假说。本课题将通过趋化实验、共培养实验以及人和小鼠结肠癌标本中炎症因子、NF-κB和Lin28B表达的相关性研究来证明“炎症反应-NF-κB-Lin28B”调控轴是癌组织毗邻的正常细胞高表达Lin28B的机制；通过软琼脂克隆形成、体内成瘤以及通过抑制炎症反应而影响Lin28B表达和肿瘤发展等实验检测Lin28B介导肿瘤相关性炎症诱导肠上皮细胞恶性转化的作用。本研究将丰富人们对肿瘤发展的认识，并为肿瘤的防治提供新的策略和靶点。

结肠癌是一种炎症相关的恶性肿瘤，炎症反应能促进结肠癌的发生和发展，然而机制不清，因此一直是炎症相关性肿瘤研究领域的热点。我们的研究发现，在结肠癌组织毗邻的正常肠上皮细胞中原癌基因Lin28B高表达，而且在结肠癌组织和正常肠上皮交界处发现大量的炎细胞浸润，形成炎症反应带。据此发现，我们提出了“肿瘤相关性炎症诱导正常肠上皮表达Lin28B，进而促进肠上皮细胞恶性转化”的科学假说。.本项目中，我们首先研究了炎症诱导Lin28B在肠细胞中的表达情况。结果表明，炎症因子TNFa能够促进Lin28B的表达；通过CHIP-SEQ数据挖掘，证明Lin28B基因启动子区含有功能性的NF-kB识别位点；通过建立CAC炎症诱导的结肠癌小鼠模型，证明炎症能够在体内诱导肠癌组织中Lin28B表达增加；通过对临床结肠癌组织标本的研究，证明肿瘤组织毗邻的正常肠上皮细胞中Lin28B的表达和炎症反应具有相关性。这些研究表明，炎症反应能够促进肠细胞表达Lin28B。接下来，我们研究了Lin28B在结肠癌发生和演进中的功能。通过慢病毒载体，在永生化的结肠癌上皮细胞NCM460及结肠癌细胞系HCT116中分别过表达Lin28B，然后通过裸鼠成瘤实验及体外增殖、迁移和侵袭实验，证明Lin28B具有促进结肠癌发生和演进的功能。最后，我们对Lin28B促进结肠癌发生和演进的分子机制进行了初步探索。通过蛋白质谱技术，检测Lin28B过表达的NCM460细胞中蛋白表达变化，结果发现197个蛋白表达上调，325个蛋白表达下调。在接下来的后续研究中，我们将对这些变化的蛋白进行综合分析，以明确Lin28B调控结肠癌发生和演进的重要分子机制。.本项目的研究表明，控制炎症反应能够抑制Lin28B介导的结肠癌发生和发展，因此联合化疗和抗炎的治疗方法可能会提高结肠癌的治疗效果，从而为肿瘤治疗提供新的思路和策略。