天然杀伤受体NKp30参与NK细胞免疫突触形成的特性研究

免疫识别是免疫应答启动的先决条件，免疫突触是介于效应细胞和靶细胞之间、行使免疫识别的膜性亚结构单位。NK细胞受体在NK细胞免疫突触形成和功能整合中发挥重要作用。NKp30是新近发现的天然杀伤受体，然而其天然配体并不明确，在NK细胞免疫突触形成中的作用亦较少报道。本研究将在以往研究NK细胞活化型受体NKG2D免疫突触的基础上，采用流式细胞术，激光共聚焦，免疫共沉淀，质谱分析，抗体阻断，RNA干扰等多种技术手段，通过与NKG2D免疫突触进行系统比较，首次研究以NKp30为核心的免疫突触中关键蛋白的种类、免疫功能和信号通路，观察NKp30免疫突触形成中细胞膜脂筏运动和极化，比较不同活化状态NK细胞与不同靶细胞之间以NKp30为核心的免疫突触蛋白质谱差异，从而较完整描绘以NKp30为核心的免疫突触的形成及其特性，并籍此寻找和鉴定NKp30的天然配体，为肿瘤或自身免疫病的免疫治疗提供相关的分子靶点。

本课题以NKp30在NK细胞免疫突触中的特性为研究目的，采用自制的NKp30-Fc融合蛋白，NKp30蛋白胞外段及NKp30单克隆抗体作为工具进行研究，获得结果如下：1）NKp30参与NK细胞活化及免疫突触形成。阻断NKp30与其配体的结合，只影响NK细胞杀伤，并不影响免疫突触的形成。而阻断LFA-1两者都影响。2）PI3K-Erk1/2参与NKp30分子介导的NK细胞活化，阻断该通路可以影响NK细胞的活化，而不影响免疫突触的形成。3）通过IP及SPR鉴定，Galectin-3可以与NKp30结合。虽然Galectin-3可以抑制NK细胞的杀伤，但由于Galectin-3不表达于细胞膜上，其作用机制仍需要研究。