通过内皮素-1探索初级传入神经元感受疼痛或搔痒的细胞机制

目前尚无明确证据表明同一个初级传入神经元能处理疼痛和感觉的信号，内皮素-1（ET-1）能引起疼痛和搔痒为解决这一问题提供了很好的工具。我们发现ET-1引起疼痛和搔痒的信号通路不同，假设不同浓度的ET-1作用于初级传入神经元ETA受体激活不同的信号通路，PLC/TRPA1通路激活释放谷氨酸引起疼痛，cAMP/PKC通路激活释放GRP引起搔痒。本研究计划应用膜片钳、钙显像及免疫染色证明这两种通路位于同一个细胞内，并通过观察ET-1刺激培养神经元及脊髓片释放谷氨酸与GRP的剂量反应关系及脸颊注射模型研究不同浓度ET-1引起的疼痛和搔痒来证明我们的假设。通过本课题的研究阐明疼痛和搔痒从外周到脊髓传递的细胞机制，对搔痒的神经生物学基础有进一步的认识。由于多种病理情况下ET-1浓度升高，本课题的研究可能改变以往对一些慢性搔痒发病机制的认识，并为搔痒治疗研究开拓新思路。

本项目试图从ET-1的不同浓度与剂量出发，使用脸颊部模型不能区分开同一物质引起疼痛和搔痒的差异，发现ET-1引起搔痒的通路与热痛觉过敏也不能分开，用ETA拮抗剂BQ123，PKC抑制剂能抑制搔痒与热痛觉过敏，而ETB拮抗剂BQ788增加搔痒与热痛觉过敏。同时用ET-1刺激培养的脊髓片，未发现GRP与glutamata有明显的释放，结合新近研究进展，推测脊髓存在次级神经元接受初级神经元或感受器传递ET-1的信号。ETB受体通过阿片受体kappa亚型发挥止痒作用，阿片类物质可能通过自分泌作用于自身的KOR激活eNOS，产生NO，NO扩散到相邻的神经末稍，从而发挥止痒作用。而另一方面，完全佛氏佐剂（CFA）引起热痛觉过敏与ET-1有关，已有文献报道应用ETA拮抗剂BQ123与ETB拮抗剂BQ788均能抑制CFA引起的热痛觉过敏，但ETA拮抗剂BQ123与ETB拮抗剂BQ788对CFA引起的异常痒感觉无效。