邻苯二甲酸酯降解菌降解基因的克隆及其功能表达验证

邻苯二甲酸酯(phthalic acid esters,PAEs)是一类全球性有毒难降解有机污染物，美国国家环保局和中国环境监测总站列其为优先控制污染物。我室近年来从事三峡库区环境中PAEs的含量、毒性及生物降解研究，研究结果表明，三峡库区PAEs污染治理已成为当务之急。我室近期从重庆市污水处理厂的活性污泥和塑料厂排污出口处土壤中分离到两株邻苯二甲酸酯降解菌CQ0110Y及CQ0110G并进行了一些前期研究（见研究基础）。本课题拟构建两降解菌株的基因组文库，通过特定的筛选方法（利用降解活性）寻找包含降解基因的阳性克隆；对降解基因进行序列测定，分析其开放阅读框并在基因库中分析比较；通过RT-PCR技术进一步验证降解基因在阳性克隆中的表达并和原始降解菌株进行降解性能的比较，以便为分析两菌株降解PAEs分子机理提供依据，并为今后构建具有更高PAEs降解效率的降解工程菌以应用于污水处理做准备。