口服结肠定位给药技术致大黄蒽醌发挥泻下作用时增效减毒的机制研究

In last fund《Research on rhubarb total anthraquinones oral colon-specific drug delivery system and its effects of renal toxicity 》, rhubarb free anthraquinones were prepared into rhubarb total free anthraquinones oral colon-specific drug delivery granules（RTFA-OCDD-GN） according to the mechanism of purgative activity. Compared with rhubarb administration, RTFA-OCDD-GN not only reduced the renal toxicity but also enhanced drug effect when rhubarb anthraquinones played purgative activity. This application starts from comparing the intestinal absorption kinetics of combined anthraquinones and free anthraquinones. After gaveged rhubarb , RTFA-OCDD-GN with and without intestinal absorption enhancer to rats, the content of rhubarb anthraquinones and their main metabolites in blood, urine and excrement will be determined and the relationship of the content and purgative effect will be compared. The toxicokinetic and cell toxicokinetic results will be compared. That means we will compare the similarities and differences in vivo between rhubarb and RTFA-OCDD-GN from PK-PD model,accompanied toxicokinetic and cell toxicity to reveal the mechanism of effect-enhancing and toxicity-reducing of rhubarb total anthraquinones oral OCDDS. This application is further reaserch on the last fund, that is we developed preparation of effect-enhancing and toxicity-reducing according the the mechanism of purgative activity, then will investigate the mechanism of effect-enhancing and toxicity-reducing of the preparation. This will provide theoretical support for better playing purgative activity of rhubarb anthraquinone compounds and further development of the preparations contain rhubarb.

上个基金《大黄蒽醌口服结肠定位给药技术及其对肾毒性影响的研究》中，课题组根据大黄蒽醌的泻下机理，将大黄游离总蒽醌制成了口服结肠定位释放颗粒（RTFA-OCDD-GN），与大黄药材相比，RTFA-OCDD-GN减小了大黄蒽醌发挥泻下作用时的肾毒性，同时达到了增效的目的。 本申请从比较结合蒽醌和游离蒽醌的肠吸收动力学入手，比较大黄药材和加与不加肠吸收促进剂的RTFA-OCDD-GN大鼠灌胃后经时血液、尿液和粪便中原型及主要代谢产物的量及其与泻下药效的关系，以及三个样品的毒代动力学和细胞毒代动力学结果。即从PK-PD模型、相伴毒代动力学和细胞毒性作用比较三个样品检测成分体内过程的异同，揭示大黄蒽醌OCDDS的增效减毒机制。本申请是上个基金的深入研究，即从泻下机理入手研制了增效减毒制剂，再探讨制剂增效减毒的机制，为更合理地发挥大黄蒽醌类化合物的泻下作用和含中药大黄制剂的进一步开发提供理论支持。

项目的主要研究内容均按照计划进行，结果达到预期目标。 .（1）样品的制备及评价. ①采用离子交换方法制备大黄游离总蒽醌提取物，提取物中总蒽醌含量为54.5%。. ②RTFA-OCDD-GN 制备：采用高速搅拌制粒法制备大黄蒽醌颗粒，再采用双层包衣工艺进行RTFA-OCDD-GN的制备，内层包结肠酶解型材料-壳聚糖，外层包pH控释肠溶衣膜-Eudragit S100，得到RTFA-OCDD-GN。在胃、小肠、结肠中的释放分别为5.85％，12.08％，72.63%。. ③ 采用低温提取和冷冻干燥方法制备大黄药材灌胃给药样品，总蒽醌含量为17.41％，游离蒽醌含量为9.83％，结合蒽醌含量为7.59％，游离蒽醌与结合蒽醌二者比例为1.30：1。.（2）分析方法的建立.建立了HPLC-DAD 测定血液、尿、粪便中成分的分析方法，5种蒽醌分离效果良好，样品回收率均达到70%以上。.（3）药代动力学和排泄动力学研究.选择大鼠为模型动物，实验过程中分别采集大鼠在不同时间点的血液和不同时间段内的尿液和粪便。HPLC-DAD 法测定生物样品中游离蒽醌的量，比较大黄药材与RTFA-OCDD-GN药代动力学及排泄动力学的差异。. 以上研究内容均按照计划书中的要求，完成相关试验，制备的RTFA-OCDD-GN泻下药效与原药材相当，收率更高，HPLC-DAD 分析方法合理可行。与大黄药材组相比，RTFA-OCDD-GN组的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的Tmax均延长，Cmax均减小，AUC(0-t)、AUC(0-∞)均减小，而且表观分布容积和半衰期也都减小，同时排泄动力学研究结果表明原型蒽醌成分排泄率增加。这些结果都进一步证明了大黄蒽醌口服结肠定位颗粒可降低大黄蒽醌的肾毒性，达到了实验预期的目的。 . 相关研究投稿论文5篇，其中发表论文2篇，接收1篇，培养硕士研究生2名。.