基于miRNA-126和miRNA-467b调控作用探索冠心康方治疗动脉粥样硬化的分子机制

MicroRNA-126 is involved in the regulation of vascular endothelial cell (VEC) damage and repair, and microRNA-467b is involved in the regulation of lipid metabolism and inflammatory factors, which play an important role in the formation of atherosclerosis (AS). Our previous study found that Guanxin Kang has regulation of blood lipids, anti-inflammatory, endothelial protection and anti-AS role, but its specific molecular mechanism is not clear, there is no Chinese medicine related research reports. Therefore, we suggest that the mechanism of AS and endothelium protection may be related to the regulation of miRNA-126 and its downstream signals GRS16, CXCL12, CXCR4 and VCAM-1. The lipid-lowering and anti-inflammatory mechanisms may be related to the regulation of miRNA-467b, Macrophage lipid accumulation, inhibition of IL-6, IL-1β, TNF-α and MCP-1 and other inflammatory factors. This study was to clarify the regulation of microRNA-126 and microRNA-467b and its downstream related signals from the molecular, cellular, tissue and animal levels, and to reveal the molecular mechanism of TCM prevention and treatment of AS, Provide new ideas.

微小mRNA(miRNA)在动脉粥样硬化（AS）的形成中具有重要的作用，其中microRNA-126参与调控血管内皮细胞（VEC）损伤与修复，microRNA-467b参与调控脂质代谢与炎症因子。我们前期研究发现，冠心康具有调节血脂、抗炎、内皮保护和抗AS的作用，但其具体分子机制还不明确，目前也未见中医药相关研究报道。因此我们提出假设：冠心康防治AS，内皮保护机制可能与调控miRNA-126及其下游信号GRS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1表达有关；调脂和抗炎机制可能与调控miRNA-467b，减少巨噬细胞脂质蓄积，抑制IL-6、IL-1β、TNF-α和MCP-1等炎症因子分泌有关。本课题拟从分子、细胞、组织以及动物水平等多层次明确冠心康对microRNA-126和microRNA-467b及其下游相关信号的调控，揭示中医药防治AS的分子机制，为AS相关疾病的防治提供新思路。

微小mRNA(miRNA)在动脉粥样硬化（AS）的形成中具有重要的作用，其中microRNA-126参与调控血管内皮细胞（VEC）损伤与修复，microRNA-467b参与调控脂质代谢与炎症因子。我们前期研究发现，冠心康具有调节血脂、抗炎、内皮保护和抗AS的作用，但其具体分子机制还不明确，因此我们提出假设：冠心康防治AS，内皮保护机制可能与调控miRNA-126及其下游信号GRS16、CXCL12、CXCR4、VCAM-1表达有关；调脂和抗炎机制可能与调控miRNA-467b，减少巨噬细胞脂质蓄积，抑制IL-6、IL-1β、TNF-α和MCP-1等炎症因子分泌有关。研究结果显示：实验1：体外实验结果显示，与对照组相比，冠心康高低剂量组的VEC凋亡率和增殖率明显优于模型组（P均＜0.05）；与对照组相比，冠心康高低剂量组VEC中miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显优于模型组（P＜0.05）。体内实验结果显示，与对照组相比，冠心康高低剂量组主动脉miR-126、RGS16、CXCL12、CXCR4和VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显优于模型组（P＜0.05）。实验2：细胞实验结果显示，经过含药血清干预后，两个冠心康组巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达明显高于模型组（P＜0.05）；两个冠心康组巨噬细胞中LPL mRNA表达明显低于模型组（P＜0.05）；两个冠心康组巨噬细胞内的TC、CE水平明显低于模型组（P＜0.05）；两个冠心康组巨噬细胞内的FC水平明显高于模型组（P＜0.05）。动物实验结果显示，两个冠心康组主动脉pri-miR-467b mRNA表达明显高于模型组（P＜0.05），主动脉中LPL mRNA表达明显低于模型组（P＜0.05），血清中IL-6、IL-1β、TNF-α和 MCP-1水平明显低于模型组（P＜0.05）。小鼠主动脉HE染色结果发现，模型组小鼠血管管径厚薄不均匀，斑块形成明显，AS斑块截面积显著大于其他各组。冠心康高低剂量组小鼠主动脉各层结构正常，病变程度明显轻于模型组。因此，冠心康抑制AS作用机制可能与调控miRNA-126及其下游信号表达，调控miRNA-467b靶向LPL调控巨噬细胞，减少炎性因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积有关。