人巨细胞病毒microRNA对宿主细胞mRNA转录后调控的生物学功能研究

miRNA是具有基因转录后调控功能的小RNA。目前证实在人巨细胞病毒中存在14种miRNA。除miR-UL112-1，miR-US25-1和miR-US25-2有研究外，其余miRNA的生物学功能尚不清楚。前期研究中，我们从采用hybrid-PCR方法建立的人巨细胞病毒miRNA候选靶mRNA池中筛选出了部分miRNA在人胚肺细胞中的候选靶基因；通过荧光素酶报告实验和免疫印迹实验证实了miR-US25-2-3p 等多种miRNA的靶mRNA主要涉及感染细胞的能量代谢、生物大分子合成、细胞周期调节和细胞凋亡等基因。表明人巨细胞病毒miRNA主要通过调节细胞mRNA的转录后翻译在感染细胞中创造有利于病毒复制的细胞内微环境。本项目拟从以上四个方面研究人巨细胞病毒miRNA对宿主细胞mRNA转录后调控的生物学功能。对揭示病毒与感染细胞之间的相互作用关系，阐明人巨细胞病毒感染致病机理具有重要意义。

依据最新研究报道，人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus, HCMV)编码至少26种miRNA。为了研究HCMV编码的miRNA的生物学功能，本项目采用了Hybrid-PCR方法筛选miRNA候选靶基因、荧光素酶实验验证miRNA与特定靶基因的结合能力、免疫印迹实验验证miRNA对靶基因蛋白质表达的影响、RT-PCR方法检测HCMV自然感染状态下miRNA的表达情况，观察miRNA及其靶基因表达水平改变对病毒复制和细胞生物学行为的影响等方面研究了mir-UL148D等当时报道的10种HCMV 编码的重要miRNA的生物学功能。研究结果证实，HCMV感染早期表达的miRNA具有抑制细胞凋亡，有利于病毒复制；晚期表达的miRNA促进细胞凋亡，有利于病毒释放；其它一些HCMV US区编码的miRNA具有抑制病毒复制以利于病毒适应细胞环境变化，有利于病毒生存。本项目揭示了HCMV 编码的重要miRNA的生物学功能，对全面了解HCMV与宿主细胞的相互作用关系、揭示病毒致病机理具有十分重要的学术意义。.本项研究已发表SCI收录杂志论文7篇，标志着本研究在这一领域处于国际先进水平