易变山羊草抗禾谷孢囊根线虫基因分子标记及EST研究

本项目以抗性小麦近等基因系E-10及受体亲本"Lutin"为材料，通过已获得的与来自易变山羊草的抗性基因Rkn-mn1紧密连锁的RAPD标记序列设计引物，筛选稳定的SCAR标记。同时，采用人工接种禾谷孢囊根线虫或根结线虫诱导，mRNA分离纯化，RT-PCR获得cDNA。利用"基因鉴定集成法"（IPGI）技术，获得抗性基因候选cDNA序列(EST)，并用与抗性基因共分离的RAPD标记OPY16-1065序列作探针，筛选抗性基因cDNA序列，经抗性分离群体验证后，通过以这些抗性基因cDNA保守序列设计引物，获得与抗性基因紧密连锁、目前迫切需要的、新的分子标记，用于辅助抗性基因转移研究。并利用RACE技术，克隆扩增包含完整阅读框的cDNA序列，获得抗性基因cDNA全长序列，为进一步对该抗性基因克隆、研究其结构、功能奠定扎实基础。