抗原呈递元件APM表达缺失对宫颈癌进程的标记作用及其与HPV感染的关系研究

抗原呈递元件（antigen processing machinery, APM）表达缺失可能是人类淋巴细胞抗原Ⅰ（human leukocyte antigen classⅠ， HLA-Ⅰ） 表达缺陷的重要原因。HPV（human papillomavirus）是宫颈癌发生的首要因素，其致癌蛋白也能引起HLA-Ⅰ表达调控异常，但是HPV对APM表达调控的影响机制尚需查证。维吾尔族妇女宫颈癌的发病率高，早期发现是有效治疗的关键。本研究拟收集维吾尔族妇女宫颈癌及癌前病变组织标本，通过HPV芯片、甲基化特异性PCR及免疫组织化学筛查，分析HPV感染引起APM表达缺陷的机制及其对宫颈癌进程的标记作用，评价早期预警价值；通过HPV致癌蛋白的原代角化细胞内表达分析， 揭示HPV感染与APM基因表达调控的直接依存机制，为族群和宫颈癌特异的疫苗预防及免疫治疗提供理论基础。

维吾尔族妇女宫颈癌发病率高，死亡率高，远远超过全国平均水平，是新疆特高发肿瘤。HPV是宫颈癌发生的主要因素，其在维吾尔族妇女宫颈癌的检出率也与国内外宫颈癌高发人群水平相当。利用维吾尔族宫颈癌疾病资源，开展宫颈癌的基础与临床研究，揭示宫颈癌发病发展规律，寻找HPV致病与致癌的生物学本质，建立肿瘤分子标志物体系及临床诊断标准，对新疆宫颈癌的临床早期诊断、基于人群的疫苗预防和临床治疗有重大社会经济意义。.肿瘤细胞的产生与生存标志着肿瘤免疫逃逸的成功，人体免疫监视与清除功能的失败。人类白细胞抗原Ⅰ（human leukocyte antigen class Ⅰ, HLA-Ⅰ）及抗原呈递元件（antigen processing machinery, APM）的正常功能是T细胞介导的免疫监视的前提。HLA-Ⅰ在APM成员的协助下，完成内源性抗原肽的组装、负载和提呈，介导抗肿瘤或病毒的细胞和体液免疫。因此，HLA-Ⅰ和APM的正常表达或表达缺陷可能决定肿瘤细胞的免疫清除，或者肿瘤生存和发展。本项目以HLA-Ⅰ和APM（10种基因）为候选基因，利用新疆维吾尔族妇女宫颈癌及癌前病变患者资源，从肿瘤和HPV病毒免疫逃逸角度出发，对宫颈癌及癌前病变、抗原呈递元件表达调控（从基因组表观遗传学修饰、基因转录mRNA和蛋白质表达水平等三种基因表达调控层次）和HPV感染三者的相互依存关系进行系统研究。同时构建HPV16致癌基因E6的慢病毒感染载体，感染宫颈原代细胞，建立模拟高危型HPV感染的细胞模型，比较分析E6基因表达前后的细胞内HLA-I类基因甲基化及APM相关分子的基因表达水平差异。结果发现：（1）宫颈癌癌前病变与抗原呈递元件成员基因TAP1、TAP2、LMP2、LMP7、ERp57和Tapasin转录下调或蛋白质表达缺失密切相关。（2）获得了宫颈癌细胞APM成员TAP1、TAP2、LMP7、Tapasin和ERp57基因启动子区内甲基化的CpG岛片段及单一CpG片段。（3）提出了TAP1、LMP7和ERp57基因的CpG片段及单一CpG位点甲基化特征序列可以作为宫颈癌及癌前病变的早期预警分子标记。（4）HPV16感染可能是基因甲基化的重要原因之一。.已完成本项目所有的研究计划，研究结果已总结并发表了9篇相关论文，其中两篇被SCI收录。其成果也通过了新疆维吾尔自治区科技厅专家组的科技