内皮祖细胞通过诱导型一氧化氮合酶（iNOS）轴对血小板功能及血栓形成的作用研究

血小板活化在动脉粥样硬化血栓形成中起关键作用。抗血小板治疗策略是心血管领域研究的热点。内皮祖细胞（EPCs）在促进血管内皮修复、防治血栓形成中至关重要。血小板参与EPCs功能的调节，但是EPCs是否影响血小板功能尚不清楚。前期研究发现：EPCs中诱导型NO合酶表达增强。推测：内皮损伤后，EPCs在促进损伤内皮损伤修复的同时抑制血小板的进一步活化，阻断血栓形成。我们拟建立体外EPCs和血小板共孵育体系，利用激光共聚焦、流式细胞术等观察EPCs对血小板活化和功能的影响，并探讨iNOS-NO-cGMP通路在EPCs抑制血小板功能中的作用；在体建立小鼠颈部动脉血栓模型，分别观察并比较体外扩增培养的EPCs、RNA干扰及基因转染EPCs对血栓形成的影响。本项目旨在为创新抗血小板策略提供理论依据，为临床防治动脉粥样硬化血栓形成提供新思路。

动脉粥样硬化血栓形成是全球首位的致死、致残病因。抗血小板药物广泛应用于心血管疾病的一级和二级预防，但抗血小板药物抵抗的出现向现有抗血小板治疗策略提出挑战。如何治疗抗血小板抵抗、寻找新的抗栓靶点是循环研究的热点。本研究通过基础及临床研究，发现：（1）小鼠骨髓源性EPCs抑制血小板活化，可能与apoA-IV上调EPCs功能相关。（2）阿司匹林抵抗患者发生不良事件的风险较敏感者显著增高，而个体化治疗较常规治疗显著减少抗血小板抵抗患者发生死亡和支架内血栓形成风险，总体不良事件也得到改善，且不增加出血风险。（3）血小板高反应群—ACS患者血浆apoA-IV水平组显著下降，且与病情程度、心功能分级增加、纤维蛋白原含量呈负相关。（4）重组人apoA-IV显著抑制人血小板PAC-1表达及纤维蛋白原结合，及抑制活化血小板释放α颗粒内CD62P至血小板表面。Western blotting证实血小板膜表面表达胆固醇转运受体ABCG1和SRB1，说明其机制可能与apoA-IV作为胆固醇受体，接受血小板膜表面ABCG1和SRB1逆向转运的胆固醇、进而改变血小板膜脂质结构有关。这为临床发掘新型有效的抗血小板剂提供理论依据，及为防治动脉粥样硬化血栓提供新策略。