动物源性食品中多类药物残留同时检测的前处理方法研究

随着药物残留分析对象和样本数量的不断增加，迫切需要发展多类（Multi-class）药物残留检测方法，提高检测效率。通过选取大环内酯类、磺胺类和喹诺酮类中的代表药物进行结构改造并设计蛋白结合物，分别制备具有簇特异性的单克隆抗体，选择适宜条件将三种抗体与载体偶联，制备多类药物残留免疫亲和色谱柱，建立同时分离净化上述三类药物的多类残留免疫亲和色谱样品前处理方法；通过将三种抗体同时偶联于熔融石英毛细管，建立同时分离净化上述三类药物的免疫亲和-固相微萃取样品前处理方法；通过筛选和设计新的萃取介质，优化相关参数，建立可以同时分离净化多类药物（如二氨基嘧啶类、四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类、β-内酰胺类等）的固相微萃取样品前处理方法。本项目旨在围绕国家食品安全的需求，将免疫亲和色谱和固相微萃取应用于多类药物残留检测的样品前处理，为探索原创性的药物残留检测新方法提供理论基础和科学借鉴。

动物性食品中的兽药残留严重危害人类的健康，倍受关注。本研究建立了可以提取和净化多种（类）药物的多残留免疫亲和色谱（MIAC）、固相微萃取（SPME）、分子印迹（MIP）、以及IAC-SPME和MIP-SPME样品前处理方法，并将其与液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）结合，建立了相关残留检测方法，为残留监控提供常规定量和确证手段，为建立新的药物残留检测方法提供借鉴。①利用合成的磺胺甲噁唑、恩诺沙星和四环素单克隆抗体，成功制备了可以同时分离净化11种喹诺酮类（QNs）、10种磺胺类（SAs）和4种四环素类（TCs）的MIAC柱，柱容量为1120～1712 ng/mL gel；②利用合成的磺胺甲噁唑、恩诺沙星和泰乐菌素的单克隆抗体，成功制备了可以同时分离净化11种QNs、10种SAs和2种大环内酯类（MALs）的MIAC柱，柱容量为1043～1778 ng/mL gel；③建立了可以同时检测鸡肌肉中2种MALs、8种SAs和8种QNs残留的MIAC-LC-MS/MS方法，回收率为74.5%～108.5%，变异系数低于16.3%，定量限为0.2～2.0 ng/g；④利用磺胺甲噁唑单克隆抗体成功制备了MIAC-SPME探头，对10种SAs具有交叉反应性，萃取量为742～978 pg；⑤建立了牛奶中10种SAs残留检测的MIAC-SPME-LC-MS/MS方法。回收率为51.6%～87.2%，变异系数为2.1%～17.7%，定量限为0.02～0.06 ng/mL。由于MIAC-SPME探头萃取量低（pg级），不适合定量残留分析，但净化效果优异、检测限低，可以用于定性分析的样品筛选，特别是违禁药物的残留监控；⑥以MIP作为新的萃取介质，制备了可以分离净化β2-受体激动剂的MIP-SPME探头，分别建立了牛奶中β2-受体激动剂残留检测的MIP-SPME-LC-MS/MS、MIP-SPE-LC-MS/MS和SPE-LC-MS/MS方法，并对3种方法进行比较，结果表明MIP-SPME方法有机溶剂用量小、操作简便；⑦筛选了商品化的萃取介质，并对相关参数进行优化，建立了同时检测牛奶中18种SAs、11种QNs、6种MALs残留的SPME-LC-MS/MS方法。回收率为31.2%～117.6%，变异系数低于26.4%，定量限为0.3～0.8 ng/mL。