内皮型一氧化氮合酶在电针改善脓毒症后认知功能障碍中的作用研究

Sepsis survivors exist long-term cognitive dysfunction, which seriously impact the quality of life. Nitric Oxide (NO) effective treatment is available till now. Existing results show endothelial nitric oxide synthase (eNOS) can regulate the generation of brain amyloid (Aβ) activate microglia and increase the synthesis of brain derived neurotrophic factor (BDNF), which was the main contribute to cognitive dysfunction after sepsis. Our previous study indicated that electroacupuncture could regulate GABA neural pathways. Because of the activation of GABA neural pathways can increase the activity of eNOS, we hypothesize that electroacupuncture can activate GABA/GABAR pathway, activate or upregulate the expression of eNOS, and then decreased the cognitive dysfunction caused by sepsis. This study aims to observe the effect of electroacupuncture on cognitive function and detect brain eNOS and Aβ of sepsis in surviving mice at day 30th. Make sure the effects of eNOS regulation mediated by GABA pathways on treatment of cognitive dysfunction in sepsis induced by electroacupuncture. This study could explain the mechanism of neural vascular adjustment induced by electroacupunture, and could provide promoting theoretical support for the clinical application of electroacupuncture in the treatment of cognitive dysfunction after sepsis.

脓毒症幸存者存在长期认知功能障碍，严重影响其生活质量，尚缺乏有效治疗措施。研究表明，血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)可调控脑内淀粉样蛋白（Aβ）生成、小胶质细胞激活及脑源性神经营养因子（BDNF）合成，这些是导致脓毒症后认知功能障碍的主要原因。我们前期工作发现电针可调控GABA能神经通路。鉴于激活GABA能神经通路可增强eNOS活性，我们推测：脓毒症后实施电针治疗，可通过激活GABA能神经通路，增加eNOS活性和（或）表达，改善脓毒症后认知功能障碍。本项目拟采用盲肠结扎穿孔小鼠模型，观察电针对脓毒症幸存小鼠30天后认知功能、脑内eNOS以及Aβ等的影响，并采用eNOS基因敲除、GABAR阻断等干预手段，明确GABA能神经通路介导的eNOS调控在电针改善脓毒症后认知功能障碍中的作用，旨在从神经血管调节角度阐释电针作用机理，为促进电针在治疗脓毒症后认知功能障碍中的临床应用提供理论依据。

近年来，越来越多的临床研究表明，脓毒症幸存者存在长期认知功能障碍，严重影响其生活质量，目前尚缺乏有效治疗措施。研究表明，血管内皮型一氧化氮合酶（eNOS）可调控脑内淀粉样蛋白（Aβ）生成、小胶质细胞激活及脑源性神经营养因子（BDNF)合成，这些事导致脓毒症后认知功能障碍的住院原因。因此提出本项目假说：脓毒症后实施电针治疗，增强eNO活性或表达，改善脓毒症后认知功能障碍。. 本研究发现：1. 与脓毒症脑病小鼠相比，电针组小鼠学习、记忆能力增强（潜伏期短、穿越平台次数增多），有统计学差异；表明电针可以改善脓毒症后幸存小鼠的认知功能；2. 电针组小鼠脑内eNOS活性明显增强，NO含量增多，说明电针改善脓毒症后小鼠认知功能与eNOS活性相关；3.与脓毒症脑病小鼠相比，电针组小鼠脑内Aβ明显减少，有统计学差异；4. 与脓毒症脑病小鼠相比，电针组小鼠脑内BDNF、Iba-1无统计学差异，提示电针改善脓毒症后小鼠认知功能与BDNF及小胶质细胞的激活关系不明显；5. 与CLP+Saline+电针组相比，CLP+L-NAME+电针组小鼠潜伏期延长、穿越平台次数减少；6. 与CLP+Saline+电针组相比，CLP+L-NAME+电针组小鼠脑内eNOS活性降低，NO含量显著减少；Aβ含量明显升高，有统计学差异。提示电针可以通过激活eNOS改善脓毒症后小鼠认知功能，可能与降低下游Aβ的沉积有关。. 本研究试图证明电针在改善脓毒症后神经后遗症的作用效果，并阐明其相关机制，将有助于推动电针应用于脓毒症后的临床治疗，实现将基础研究成果应用于临床工作的转化医学研究目标，为改善脓毒症患者的预后做出贡献。