采用定位候选克隆策略结合生物信息学分析及半定量RT-PCR,已获得多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)患者及MM细胞株ARH-77中表达下调的新基因MYETS1(GenBank收录号:AY368652)。本项目拟构建MYETS1原核表达重组质粒,以期获得原核表达蛋白产物,并纯化后免疫动物,制备抗体,Western blot进一步检测MYETS1表达是否下调。构建真核表达重组质粒,转染ARH-77细胞株,G418筛选,RT-PCR、Western blot检测转染阳性克隆,获得稳定转染细胞阳性克隆,进行体内体外实验研究以确定MYETS1基因的功能。同时用cDNA微阵列检测转染阳性细胞克隆的肿瘤相关基因的表达水平及酵母双杂交研究MYETS1在信号转导中的作用。该抑瘤候选基因的克隆及功能分析将为研究MM发病机理及早期诊断、治疗提供新的分子靶。
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数据更新时间:2023-05-31
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