斑点叉尾鮰病毒吸附蛋白的初步确定及其与CCO细胞的相互作用

首先用斑点叉尾鮰病毒感染敏感细胞（CCO），采用蔗糖密度梯度超速离心法分离纯化病毒，并提取病毒的基因组核酸。然后以病毒基因组为模板，进行5个囊膜蛋白的原核表达并制备抗体。将表达所得的斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白进行细胞吸附实验，分别与敏感细胞（CCO）孵育，加入荧光标记的抗体，利用流式细胞仪，初步确定能够与细胞相吸附的囊膜蛋白。再将初步确定的吸附蛋白进行空斑测定实验，分别与敏感细胞（CCO）孵育，并用病毒进行感染，计算空斑数目，可进一步确定病毒的吸附蛋白，并研究其对病毒吸附细胞的竞争性。 通过蚀斑减少中和实验，将相应的吸附蛋白抗体与病毒孵育后，再感染敏感细胞（CCO），计算空斑数目，从而确定具有中和能力的吸附蛋白抗体。本项目主要研究斑点叉尾鮰病毒的囊膜蛋白，以及其与宿主细胞的相互作用，不仅为揭示斑点叉尾鮰病毒的致病机理提供理论基础，同时为该病毒的分类地位提供重要的理论依据，具有重要的生物学意义。