抗CD20治疗性抗体Rituximab的耐药机制研究

The anti-CD20 chimeric antibody rituximab was approved for treatment of B-cell non-Hodgkin's lymphomas in 1997. Despite its effectiveness, approximately 60% of prior rituximab responding patients will not longer benefit with re-treatment with this monoclonal antibody. Elucidating the molecular mechanisms underlying rituximab resistance and overcoming rituximab resistance represents an important challenge to improving outcomes for patients with B-cell non-Hodgkin's lymphomas. In our previous studies, we established rituximab-resistant B-lymphoma cell lines by modelling the development of acquired resistance in patients. Moreover, we obtained a rituximab mutant (rituximabmut) by a computational design method, and rituximabmut exhibited potent therapeutic efficacy in the rituximab-resistant lymphoma model. In the present study, we will eastablished several pairs of rituximab-sensitive and -resistant lymphoma cell lines. The antitumor mechanisms of action of rituximabmut will be also disclosed. With the help of gene chip and proteomics technology, we will elucidate the molecular mechanisms of resistance to rituximab. The results of this study will help to develop more effective therapeutic strategies for treatment of rituximab-resistant B-cell lymphomas.

抗CD20抗体Rituximab于1997年获批用于B细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗。尽管Rituximab显示出良好疗效，但约60％对Rituximab首次治疗产生反应的患者对Rituximab再次治疗产生耐药。阐明Rituximab耐药机制、克服其耐药是临床上的迫切需求。在前期研究中，我们通过模拟患者对Rituximab产生耐药的过程建立了Rituximab耐药B淋巴瘤细胞株，并且通过计算机辅助设计获得了一株能有效杀伤Rituximab耐药B细胞淋巴瘤的CD20抗体Rituximabmut。在本项目中，我们将建立多对Rituximab敏感和耐药B淋巴瘤细胞株，利用前期获得的Rituximabmut，同时借助基因芯片和蛋白质组学技术寻找候选耐药相关分子并进行功能鉴定，阐明Rituximab耐药机制。这个项目的开展将为发展更为有效的Rituximab耐药B细胞淋巴瘤的治疗策略提供基础。

抗 CD20 嵌合抗体 Rituximab于 1997 年获批用于 B 细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗。尽管 Rituximab 显示出良好疗效，但约 60％对 Rituximab 首次治疗产生反应的患者对 Rituximab 再次治疗产生耐药。阐明Rituximab 耐药机制、克服其耐药是临床上的迫切需求。在前期研究中，我们通过计算机辅助设计获得了一株能有效杀伤 Rituximab 耐药 B 细胞淋巴瘤的 CD20 抗体 Rituximabmut。在本研究中，我们通过模拟患者对Rituximab 产生耐药的过程建立了多株 Rituximab耐药 B 淋巴瘤细胞株。实验结果表明，Ritiximab耐药B淋巴瘤细胞株对Rituximab介导的凋亡诱导作用产生了耐受，但Rituximabmut仍能有效介导Rituximab耐药B淋巴瘤细胞产生凋亡。荷瘤小鼠体内实验进一步表明Rituximabmut可有效抑制Rituximab耐药B淋巴瘤生长。实验结果提示Rituximabmut强烈的凋亡诱导活性可能是其克服Rituximab耐药的重要机制。在Rituximabmut的基础上，我们对自主研发的一株具有高效CDC活性的CD20人源化抗体hu8E4进行了优化改造，获得了亲和力增强的hu8E4突变体hu8E4D57E。实验结果表明hu8E4D57E具有比hu8E4明显增强的ADCC活性，荷瘤小鼠体内实验进一步证实hu8E4D57E能有效克服Rituximab耐药。因此，hu8E4D57E可能发展成为用于治疗Rituximab耐药淋巴瘤的新型抗体制剂。