角蛋白基因变异与乙型肝炎病毒相关性肝病的关系

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）感染严重危害健康，有明显的种族倾向及家族聚集性，遗传因素可能是重要原因之一。角蛋白（Keratin，K）有重要的肝细胞保护功能。我们前期的研究已经证明角蛋白基因变异是多种肝病发病的危险因素而且与疾病的严重程度相关，近期，我们的初步探讨也发现HBV相关性肝病存在角蛋白基因变异。本项目拟用变性高效液相色谱法结合DNA直接测序等分析国人HBV相关性肝病角蛋白（K8/K18）全部编码基因的变异情况及其与疾病严重程度的关系、K8/K18基因变异患者一级亲属（父母及兄弟姐妹）的基因变异情况、通过细胞转染及建立转基因动物模型证实新发现的变异位点对细胞及肝脏功能的影响，从而首次探讨国人HBV相关性肝病角蛋白基因变异的特点及其对家庭聚集性发病的的影响，旨在为HBV相关性肝病的发病机制提供线索，为开辟新的基因治疗途径奠定理论基础，具有重要的现实意义。

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）感染在我国高度流行，有明显的种族倾向及家族聚集性。角蛋白基因变异是多种肝病发病的危险因素，可能与HBV感染相关。本项目采用DNA测序分析中国人HBV相关性肝病中角蛋白片段8（Keratin 8，K8)和18（Keratin18，K18)编码基因变异，包括慢性乙型肝炎(CHB)174例，乙肝肝硬化失代偿(HBLDC)192例及原发性肝癌(PLC)174例。发现中国人群中HBV相关肝病患者角蛋白总变异（包括错义突变及检测片段中内含子变异）44例，总变异率达8.15%，而对照组仅1例变异（0.58%），病例组角蛋白变异率显著高于对照组(p=3.66*10E-6)。错义突变及内含子变异比例同样高于对照组（3.89% vs 0.58%，p=0.03，4.26% vs 0%，p=0.045）。两两比较仅发现CHB组的错义突变率高于对照组（6.32% vs 0.58%，p=0.006），而HBLDC组及PLC组与对照组相比变异率并无差异（p>0.05）。其中病例组错义突变共发现21例，变异率3.89%，以K8R341H (13例) 最频繁，其余变异位点K8R469C、K8R469H、K8 A447V、K8 P499A、K8K483T 各一例，后者均为首次发现的变异。保守性分析显示K8 A447V外除所突变位置均位于保守区。CHB亚组中，相比于无突变的患者，伴有角蛋白错义突变的患者病毒载量更高（p=0.037），且与预后不良程度正相关的终末期肝病模型MELD评分值更高（p=0.024）。但角蛋白错义突变患者中HBV家庭成员阳性感染史比例与未携带变异者比例并无显著差异。角蛋白变异在HBV感染聚集家系和对照家系的分布无统计学差异。上述结果提示角蛋白错义突变可能是CHB患者病情加重的易感因素，但是不支持角蛋白变异与HBV相关肝病的发病家族聚集性关系相关。