Akt信号通路调节的microRNAs在胃癌发生发展中的功能和机制

Akt信号通路以及microRNAs在胃癌的发生发展过程中发挥重要的作用，然而受Akt 信号通路调节的miRNAs如何在胃癌发生发展中准确执行Akt 信号通路的功能以及通过怎样的靶分子如今尚未报道。本项目将利用小鼠腺胃上皮细胞中特异性敲除PTEN基因的小鼠胃癌模型筛选受Akt 信号通路调节的miRNAs，对这些miRNAs影响胃癌细胞增殖、凋亡和迁移等功能进行验证和评价，并筛选和鉴定新的靶分子。同时在人类胃癌标本中检测磷酸化的Akt、miRNAs以及下游靶分子的表达变化以及考察三者之间的相关性。选取部分miRNAs研制组织特异性miRNA转基因和基因敲除小鼠，在生物整体、组织细胞和分子水平对这些小鼠的表型进行系统分析。上述研究将为理解Akt信号通路异常在胃癌中的作用提供新的理论基础，为发展胃癌的个体化治疗策略研究提供新的靶标以及新的动物模型。

胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤。我国是胃癌的高发区，约占全世界一半。胃癌的病因及发病机制至今尚未完全阐明。PTEN作为最重要的抑癌基因可以特异性地抑制Akt信号通路的激活。在人胃癌样本中PTEN显著下调，但PTEN缺失是否可以起始胃癌的发生以及其分子机制尚不知晓。我们的研究显示100%的胃上皮敲除PTEN基因敲除小鼠子在出生2个月内发生胃癌。利用这一胃癌小鼠模型筛选到下降表达的miR-365。进一步的研究揭示PTEN缺失导致的Akt激活通过下调转录因子的p53丰度抑制miR-365的转录。体外实验表明miR-365通过靶向抑制cyclin D1和Cdc25A的表达抑制胃癌细胞增殖和成瘤。在小鼠体内胃上皮敲除Akt1逆转PTEN缺失导致的细胞增殖和p53-miR-365-cyclinD1/cdc25A调控轴的变化。胃原位注射miR-365部分逆转了PTEN敲除导致的细胞增殖和cyclin D1/cdc25A的表达上升。最后，在人胃癌样本中，miR-365的低表达与分化、浸润和进展密切相关，并与上游调节因子PTEN、Akt和p53以及下游靶分子cyclin D1/cdc25A相关。上述研究阐明了PTEN-Akt-p53-miR-365-cyclin D1/cdc25A调控轴与胃癌发生间的直接因果关系，为理解人类胃癌发生机制提供全新的认识，并为临床胃癌的诊治奠定了理论基础和新的遗传修饰小鼠模型。