新生大鼠高氧动物模型肠黏膜损伤机制研究

新生儿呼吸衰竭最有效的治疗方法是氧疗(即机械通入高浓度的氧，简称高氧)。此疗法虽挽救患儿生命，但长时间高氧治疗会引起肺、脑、眼等近隔器官损伤，近年陆续报道长期高氧治疗还引起新生儿肾、肝、肠等远隔器官损伤。本课题组前期研究发现新生大鼠高氧动物模型肠道分泌性IgA(SIgA)和分泌片(SC)升高，预示肠黏膜发生变化，此变化是因高氧的氧毒性致肺等近隔器官损伤后肠道继发损伤还是高氧的氧毒性直接作用肠道使肠道发生原发性病变是本课题研究重点。众所周知高氧的氧毒性引起器官损伤的最主要根源是活性氧( ROS)，因此本课题通过建立新生大鼠高氧动物模型，应用组织培养、细胞培养、转染、iRNA干扰、流式细胞分析术、蛋白和分子生物学检测等技术探讨新生大鼠高氧动物模型肠黏膜损伤可能是因继发或原发由ROS引起，有关此研究将有助于了解高氧对肠道的损伤影响，对临床预防高氧治疗引起的新生儿后遗症将起重要作用。

当前临床抢救新生儿呼吸衰竭最有效的方法是氧疗法，即机械通入高浓度的氧(简称高氧)。此疗法虽挽救患儿生命，但长时间高氧治疗不仅会引起肺、脑、眼等近隔器官损伤，而且还引起新生儿肾、肝、肠等远隔器官损伤。由于出生前胎儿肠道处在相对低氧的环境中，出生后新生儿肠绒毛和黏膜将继续分化和生长，因此出生后长期高氧治疗将引起新生儿肠道的发育异常。肠道是机体吸收营养的重要器官，新生儿肠道的发育异常必然引起机体营养吸收障碍，因此研究高氧对新生儿肠道影响至关重要。.本课题组已完成新生大鼠高氧动物模型的建立；电镜观察了肠黏膜形态变化，得出长期高氧导致肠黏膜损伤，并且高氧动物模型肠道AKT信号通路发生变化；ELISA检测了肠液D-乳酸、内毒素、二胺氧化酶（DAO）、脂肪酸结合蛋白（FABP）、肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）和肝脏脂肪酸结合蛋白（L-FABP ），证明新生大鼠高氧动物模型肠道菌群和肠黏膜屏障发生变化；为证明新生大鼠高氧动物模型肠黏膜损伤可能是因继发肺粘膜损伤引起，首先研究肺组织SIgA和它的组成成分IgA、SC以及肺泡灌洗液内细胞因子的变化，得出肺损伤是肠损伤的间接因素，肠损伤滞后肺损伤，可能是高氧引起肺损伤，进而激发肠损伤；为探讨肠黏膜损伤是继发还是原发由ROS引起，课题组用ROS阻止剂（2-苯叔丁基硝酮, PBN）腹腔注射，ELISA检测了肠液D-乳酸、内毒素、二胺氧化酶（DAO）、脂肪酸结合蛋白（FABP）、肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）和肝脏脂肪酸结合蛋白（L-FABP ）以及细胞因子，发现新生大鼠高氧动物模型肠黏膜损伤可能是因继发或原发由ROS引起。. 为验证高氧损伤肠黏膜是由ROS引起，课题组体外研究H2O2和高氧对肠上皮细胞的影响，已完成部分实验，部分实验在进行中。