线粒体参与的固有免疫反应在HBx介导的足细胞损伤中的作用

The injury of podocyte is the key word in the progression of hepatitis B virus-related glomerulonephritis(HBV-GN) and,but the damage mechanism remains unclear.Our preliminary studies found that podocytes in HBV-GN expressed HBx, and electron microscopy showed extensive effacement of podocyte foot processes and mitochondrial anti-viral signaling protein(MAVS) expressed abnormally. As the first discovered in innate immune proteins in mitochondria, MAVS was been showed to activate NLRP3 inflammasome pathway leading to the release of inflammatory cytokines and damage of cells by a new research.Therefore,we speculate that HBx may injury podocytes by mitochondrial MAVS innate immune response.The present study plans to observe the role of HBx on regulation of MAVS,and the effect and mechanism of MAVS in activating inflammasome and damaging podocytes by using gene transfection, RNA interference.Further more,in vivo and in vitro experiments will be used to investigate the role of HBx-induced mitochondrial fusion protein abnormality on MAVS pathway regulation.We hope it will provide a new theoretical basis for mechanism of podocyte injury in HBV-GN,and search for a new interference pathway for clinical treatment.

足细胞损伤是乙肝相关性肾病（HBV-GN）病情进展的重要原因，但其损伤机制尚不完全清楚。我们发现，HBV-GN肾小球足细胞中可见HBx表达，足细胞足突广泛融合，且线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）表达异常。MAVS作为线粒体中第一个被发现的参与固有免疫的蛋白，可激活NLRP3炎症小体途径导致炎症因子释放，损伤细胞。由此推测，HBx可能通过MAVS介导的线粒体固有免疫反应损伤足细胞。本研究拟以HBx为诱因，观察HBx对MAVS的调节作用及对线粒体形态功能的影响，并结合质粒转染、基因沉默等技术调控MAVS水平，明确MAVS在活化炎症小体，损伤足细胞中的作用。进一步通过体内外实验探讨HBx引起的线粒体融合蛋白（MFN2）异常对MAVS途径的调节作用，系统的研究HBV-GN足细胞损伤的分子机制。藉此，以MAVS为靶点，为阐明HBV-GN足细胞损伤机制提供新的理论依据，为临床防治寻找新的干预途径。

我国是乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）感染高发地区，HBV不仅引起急慢性肝炎，还有许多肝外表现，如肾损害、关节损害等其他组织和器官的病变。乙型肝炎病毒相关性肾炎（Hepatitis B Virus-related glomerulonephritis, HBV-GN）已成为我国主要的继发性肾脏病之一。HBV-GN 病变主要位于肾小球毛细血管袢，足细胞的损伤尤其突出，但其损伤机制尚不完全清楚。本课题组前期研究发现，HBx 转基因小鼠蛋白尿明显，且电镜下可见肾小球足细胞肿胀，足突弥漫性融合呈片层状改变，且线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）表达异常。故本项目想进一步系统的研究：1）MAVS在乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）中的表达及作用；2）MAVS在HBx介导的足细胞损伤中的作用及机制；3）HBx介导的线粒体融合蛋白MFN2异常对MAVS的调节作用。. 在本项目执行期间，我们首次发现HBx转染足细胞后可促进足细胞MAVS及其下游NLRP3炎症小体途径的激活。HBx可引起细胞形态的变化，亦能抑制足细胞的增殖，使足细胞标志蛋白表达减少。在这一过程中，MAVS及其下游的NLRP3炎症小体途径起重要作用。抑制MAVS表达后，足细胞损伤程度减轻。本研究也进一步发现，HBx能抑制MFN2的表达，而MFN2能抑制MAVS信号途径的激活。故HBx可能通过下调MFN2调节MAVS固有免疫途径，加重足细胞的损伤。本研究深入探讨了HBV-GN进展的可能机制，为临床治疗HBV-GN提供了新的潜在靶点及理论依据。