EPCs对BMSCs干细胞特性的维护及雌激素调控作用的研究

雌激素缺乏是绝经后妇女骨质疏松的重要原因，常导致牙槽骨吸收加快，牙周组织的再生与修复困难。此外，在雌激素缺乏微环境下，用于组织再生的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的骨向分化能力降低，改善局部微环境将有利于其分化和骨再生。本课题将从如何提高BMSCs的增殖与骨向分化能力及牙周组织缺损修复效果入手，以血管内皮祖细胞(EPCs)对BMSCs增殖与分化的促进作用为切入点，采用Transwell共培养、构建EPCs/BMSCs细胞膜片、免疫荧光双标记、荧光原位杂交示踪、激光共聚焦纤维镜活细胞动态观察、micro-CT及Luminex等技术，研究EPCs对BMSCs干细胞特性的维护作用，EPCs/BMSCs细胞膜片微环境对BMSCs骨向分化能力的影响及雌激素的调控作用，探明雌激素缺乏情况下牙槽骨修复与再生能力降低的原因，为提高牙槽骨缺损修复效果奠定理论基础，并创建骨组织缺损修复的新思路。

雌激素缺乏是绝经后妇女骨质疏松的重要原因，常导致牙槽骨吸收加快，牙周组织的再生与修复困难。此外，在雌激素缺乏微环境下，用于组织再生的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的骨向分化能力降低，改善局部微环境将有利于其分化和骨再生。本课题采用Transwell 共培养、细胞膜片、荧光标记、Real time RT-PCR、Western blot、激光共聚焦、Micro-CT、免疫组化等技术与方法，研究了EPCs 对 BMSCs干细胞特性的维护作用；EPCs/BMSCs复合细胞膜片微环境对BMSCs骨向分化能力的影响及雌激素的调控作用。研究结果表明：EPCs 能够维护体外培养的BMSCs 的干细胞特性；EPCs可逆转去势大鼠BMSCs的干细胞特性； 构建的EPCs/BMSCs复合膜片其成骨能力强于单纯 BMSCs 细胞膜片及单纯EPCs细胞膜片； EPCs/BMSCs复合膜片中EPCs与BMSCs两种细胞存在细胞间交流； 体内实验结果表明，应用EPCs/BMSCs复合膜片能够较好的修复去势大鼠牙槽骨缺损。以上研究结果为临床提高雌激素缺乏情况下牙周组织缺损修复与再生的效果奠定了研究基础。