hSSB1对肝癌细胞p53的调控作用及其机制

hSSB1(人类单链DNA结合蛋白)是最新发现、与基因组稳定性密切相关的关键分子，但其作用机制尚未阐明。抑癌基因p53在调控细胞周期、DNA损伤修复、细胞凋亡及放化疗敏感性等方面起重要作用。已有研究表明hSSB1同源物RPA可以与p53相互作用从而调控DNA损伤修复。预实验发现：si-hSSB1虽不影响p53的mRNA水平，但可导致p53蛋白稳定性降低；且hSSB1与p53存在相互作用。因此，我们提出假设：hSSB1可能通过调控p53从而发挥维持基因组稳定性的功能，本项目拟明确：1）hSSB1与p53之间相互作用的区域；2）hSSB1对p53稳定性是否通过泛素/蛋白酶体系；3）hSSB1是否影响p53转录活性；4）hSSB1是否通过p53以调控肝癌细胞的DNA损伤修复能力、细胞凋亡及其放化疗敏感性。本项目的完成，将明确hSSB1稳定p53作用及其机制和意义，为肝癌的分子靶向治疗提供新靶标。

肿瘤抑制因子p53对于参与基因毒性应激的众多细胞进程是非常重要的，包括细胞周期阻滞，DNA修复，细胞凋亡和衰老。而目前关于p53基因的调控研究主要集中在其稳定性和转录激活。然而， p53的新的调控分子最近也时常见到被鉴定。通过我们的研究发现，人类ssDNA结合蛋白质SSB1（hss B1），一种新型的DNA损伤相关蛋白，能通过与p53相互作用从而保护p53免于泛素化介导的降解。此外，hssb1可以与乙酰转移酶p300结合，它通过乙酰化p53 382位的赖氨酸从而转录激活p53的靶基因p21，这种乙酰化的修饰对于p21的有效转录激活是必须的。通过功能实验，我们发现hssb1敲除诱导的G2/M检查点废除部分依赖于p53或p300。总的来说，我们的研究结果表明，hssb1通过正调节p53及其下游靶基因p21从而调节DNA损伤检查点。