人参茎叶皂苷口服对鸡黏膜免疫功能的影响

我们在前期研究已经证明饮水口服人参茎叶皂苷（GSLS）水溶液可以显著增强鸡对滴鼻新城疫疫苗的免疫应答。本项目在此基础上，深入研究GSLS 六种主要单体成分（Rg1，Re， Rc， Rb1，Rb2和Rd）对鸡呼吸道和消化道黏膜免疫细胞的作用，以及饮水口服GSLS对鸡弱毒疫苗口服、气雾免疫，灭活疫苗注射免疫的增强作用，观察鸡呼吸道、消化道黏膜组织细胞因子（IL-10, TGF-β, IL-12, IFN-γ）、黏膜组织IgA+细胞、上皮内淋巴细胞、血清HI滴度，血清和气管冲洗液中特异性IgA和IgG水平，脾细胞对抗原刺激的增殖指数。项目从增强黏膜免疫功能的角度揭示人参补气作用的本质，为今后补益类中药的研究提供新的思路，具有重要的科学意义。项目研究结果还可以为含GSLS新兽药产品的质量控制提供参考，并为养禽业提高禽的抗病力提供新的方法，具有重要实际应用价值。

人参茎叶皂苷（GSLS）成本低廉，药理作用广泛，已载入《中国兽药典》。中药经口服给药后，直接作用于消化道黏膜。黏膜和黏膜下散在大量的淋巴细胞，构成机体的黏膜免疫系统（MIS）。本课题主要研究GSLS中各主要单体成分对鸡MIS的影响，探讨GSLS对鸡局部黏膜免疫和全身免疫反应影响。为进一步开发以GSLS主要成分的新兽药提供依据。研究取得如下进展：.1. GSLS以及主要单体成分可增强鸡肠道黏膜免疫。通过比较GSLS及其主要单体成分对鸡肠道黏膜免疫的作用，发现口服人参皂甙，除Rb2和Rg1外，可不同程度增加IgA+细胞数量，具有肠道黏膜免疫增强作用。根据促进粘膜免疫作用的强弱，它们依次为GSLS ＞ Rd ＞ Re ＞ Rb1＞Rc。.2. GSLS对鸡肠道黏膜免疫的作用呈剂量和时间依赖关系。通过比较不同给药剂量和给药时间对鸡肠道黏膜免疫的影响，发现GSLS发挥口服佐剂作用的剂量范围是2.5～10 mg/Kg体重，长期给药比短期给药的口服佐剂作用更为显著，免疫前给药优于免疫后给药口。.3.饮水口服GSLS可增强鸡对灭活疫苗的免疫应答。给免疫抑制鸡饮水口服GSLS，然后皮下注射鸡新城疫-禽流感（ND-AI）二联灭活疫苗,检查全身和局部黏膜免疫反应。结果表明，口服GSLS可使免疫抑制鸡血清抗体效价显著升高，与黄芪多糖对照组相当；GSLS可显著缓解CY对脾细胞抑制作用，显著增加鸡十二指肠IgA阳性细胞和上皮间淋巴细胞（iIELs）数量。.4.饮水口服GSLS可增强鸡对弱毒疫苗的免疫应答。给免疫抑制鸡饮水口服GSLS，然后滴鼻免疫鸡新城疫-传染性支气管炎（ND-BI）二联活疫苗，检查全身和局部黏膜免疫反应。结果表明，GSLS显著提高了免疫抑制鸡的胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的脏器指数，使免疫抑制鸡血清抗体效价显著升高，缓解CY对脾细胞的抑制作用，显著提高免疫抑制鸡十二指肠IgA阳性细胞和肠上皮间淋巴细胞（iIELs）数量。.因此，GSLS以及主要单体成分可增强鸡肠道黏膜免疫，GSLS对鸡肠道黏膜免疫的作用呈剂量和时间依赖关系。饮水口服GSLS可增强免疫抑制剂鸡对灭活疫苗和弱毒疫苗的免疫应答。在GSLS各剂量组中，以5 mg/kg BW剂量组的免疫增强作用最为显著。本研究结果对于将GSLS开发成具有临床应用价值的中兽药具有重要意义。